【摘 要】
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目的:为了研究叉头框c2(Foxc2)在骨骼和主动脉发育上的作用.方法:利用基因重组融合蛋白制作大鼠抗小鼠Foxc2单克隆抗体(抗-Foxc2 mAb),并利用蛋白质印迹和免疫荧光分析了Foxc
【机 构】
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吉林大学基础医学院病理教研室,吉林大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室,吉林大学中日联谊医院妇产科,滨松医科大学生物化学讲座
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目的:为了研究叉头框c2(Foxc2)在骨骼和主动脉发育上的作用.方法:利用基因重组融合蛋白制作大鼠抗小鼠Foxc2单克隆抗体(抗-Foxc2 mAb),并利用蛋白质印迹和免疫荧光分析了Foxc2蛋白在小鼠肌胚细胞C2C12的表达和在小鼠胚胎的表达部位.结果:用小鼠GST-Foxc2融合蛋白免疫大鼠制得的抗-Foxc2 mAb效价为1∶5 000,并特异地与转染了CX-Foxc2质粒的小鼠L细胞和人膀胱癌HTB9细胞产生的Foxc2蛋白结合.在骨成形蛋白-2(BMP-2)的诱导下,Foxc2蛋白在C2C12细胞中显著地增加,用反义Foxc2序列转染C2C12细胞可以明显地抑制Foxc2蛋白在这个细胞系中的表达.Foxc2蛋白表达主要定位于11.5-dpc小鼠胚胎的生骨节和主动脉周围的间充质组织.结论:应用大鼠抗小鼠基因重组Foxc2单克隆抗体研究Foxc2的作用,结果表明Foxc2蛋白在BMP-2的诱导下,在调节C2C12细胞向成骨细胞分化以及在胚胎中轴骨骼和心血管的形成过程中起重要作用.
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