结核杆菌Ag85A及ESAT—6双价抗原融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达

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目的 为结核病新型疫苗研究提供靶基因和靶抗原。方法 采用PCR扩增的方法获得结核杆菌两种免疫保护性抗原Ag85A及ESAT-6的基因,将其定向克隆入真核及原核穿梭表达型载体pBK-CMV构建含嵌合目的基因的重组质粒,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western-blotting对表达蛋白进行初步分析。结果 1)从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Ag85A及ESAT-6基因。2)成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达质粒pBK-85A-E6。
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