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目的寻找制备富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)的最佳离心方案,并制备PRP凝胶用于皮下注射促进大鼠皮瓣成活,探讨其有效性及作用机制。方法取12周龄健康Wistar大鼠72只,体重250～300 g。于24只大鼠心脏取动脉血8～10 mL/只,分别采用3种离心方法制备PRP。A组:以200×g离心15 min、500×g离心10 min;B组:以312×g离心10 min、1 248×g离心10 min;C组:以200×g离心15 min,200×g离心10 min。在PRP制作过程中取各组全血、PRP及贫血小板血浆(platelet-poor plasma,PPP)行血小板计数,根据血小板计数结果选择最佳离心方案,并取对应的PRP、PPP及第1次离心后血清,采用ELISA法测定PDGF-BB和TGF-β1浓度;并制备PRP及PPP凝胶。于48只大鼠背部制备大小为11 cm×3 cm的皮瓣,随机分为3组(n=16):PRP组每只大鼠皮瓣下注射100 mL PRP凝胶,PPP组同法注射100 mL PPP凝胶,对照组不作处理。术后大体观察皮瓣成活情况,7 d后取材计算成活率;组织学观察计数炎性细胞,免疫组织化学染色计数微血管;于术后8、24 h,3、7 d行实时荧光定量PCR检测VEGF、EGF、PDGF-AA和PDGF-BB mRNA表达。结果血小板计数结果示,A组血小板浓缩倍数最高,为最佳制备方法。A组PRP中TGF-β1、PDGF-BB浓度明显高于血清及PPP(P<0.05)。与对照组相比,术后PRP组伤口无脓性分泌物;PRP组皮瓣成活率为61.2%±9.1%,与PPP组35.8%±11.3%及对照组28.0%±5.4%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。PRP组炎性细胞计数较PPP组及对照组明显减少,微血管计数明显高于其余两组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测示与PPP组及对照组比较,PRP组VEGF及PDGF-BB mRNA术后均高表达,而EGF mRNA仅在术后24 h内呈高表达,PDGF-AA mRNA在3 d后开始高表达。术后3 d及7 d PRP组PDGF-AA、8 h PDGF-BB、24 h及3 d VEGF、24 h EGF的mRNA相对表达量与其他两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论以200×g离心15 min、500×g离心10 min是制备PRP的最佳离心方案。PRP凝胶可通过调节血管生发相关基因促进大鼠皮瓣成活。