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为了鉴定烟草在重金属镉胁迫处理下的功能基因，构建烟草cDNA酵母表达文库，并利用镉敏感的突变株对文库进行初步筛选。首先将烟草幼苗进行重金属胁迫处理，然后取幼根提取总RNA并纯化mRNA，采用SMART技术反转录成双链cDNA，将cDNA与入门载体pDONR222的同源重组区连接，再转到酵母表达载体pDEST22上，构建了Gateway技术兼容的酵母cDNA表达文库。经检测，构建的cDNA酵母表达文库滴度为4．32×10^6cfu／mL，库容量为0．86×10^7cfu，平均插入片段长度