异烟肼灌胃建立小鼠急性肝损伤模型的研究

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目的探索应用异烟肼灌胃建立小鼠急性肝损伤模型,并初步阐明其机制。方法昆明种小鼠50只,随机分为异烟肼正常剂量造模组(常量组)、2倍剂量造模组(2倍量组)、5倍剂量造模组(5倍量组)、8倍剂量造模组(8倍量组)和空白对照组,每组各10只。各造模组分别以90、180、450、720mg/kg剂量的异烟肼灌胃,18h后检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平并取肝组织进行光镜观察,探索导致明显急性肝损伤的相对合适剂量。另取昆明种小鼠90只,随机分为单纯造模组(40只)、干预造模组(40只)和空白对照组(10只),各造模组以相对合适剂量异烟肼灌胃,其中干预造模组于造模前以甘利欣75mg/kg体重连续灌胃5d,18、36、54、72h后分别检测血清ALT、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)水平,并进行肝组织光镜和电镜观察,探索导致明显急性肝损伤的相对合适时间及可能机制。结果在探索相对合适剂量实验中,2倍量组小鼠血清ALT、AST分别为(101.6±6.3)和(108.1±14.9)U/L,明显高于空白对照组的(30.1±3.6)、(35.3±6.5)U/L和常量组的(52.8±5.3)、(53.9±8.9)U/L,差异均有统计学意义(均P<0.05),肝细胞出现广泛的脂肪变性和水肿,肝窦几乎消失;5倍量组小鼠死亡7只,8倍量组小鼠则全部死亡。在探索相对合适时间及发生机制实验中,应用2倍剂量异烟肼灌胃后18h,单纯造模组小鼠血清ALT、MDA水平明显高于空白对照组,SOD、GSH-Px水平明显低于空白对照组,肝细胞广泛损伤,细胞超微结构显著变化。结论应用2倍剂量(180mg/kg)异烟肼灌胃可成功建立小鼠急性肝损伤模型。异烟肼所致急性肝损伤可能与自由基脂质过氧化反应密切相关。
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