【摘 要】
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目的构建分泌性表达EB病毒GM-CSF与LMP2A融合基因GCA的卡介苗重组质粒。方法分别以卡介苗(BCG)和融合基因GCA的cDNA为模板，通过PCR扩增得到139 bp的BCG-Ag85B信号肽序列和1961 bp的GCA基因序列。将BCG-Ag85B信号肽序列与大肠埃希菌-卡介苗穿梭表达载体pMV261重组，得到重组质粒pMVS，再将融合基因GCA序列亚克隆至pMVS中，得到重组质粒pMV2
【机 构】
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272067 山东，济宁医学院法医学与医学检验学院,济宁肿瘤医院检验科,济宁医学院病原生物学教研室医学免疫学省级重点学科
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目的构建分泌性表达EB病毒GM-CSF与LMP2A融合基因GCA的卡介苗重组质粒。
方法分别以卡介苗(BCG)和融合基因GCA的cDNA为模板，通过PCR扩增得到139 bp的BCG-Ag85B信号肽序列和1961 bp的GCA基因序列。将BCG-Ag85B信号肽序列与大肠埃希菌-卡介苗穿梭表达载体pMV261重组，得到重组质粒pMVS，再将融合基因GCA序列亚克隆至pMVS中，得到重组质粒pMV261-GCA。
结果质粒pMV261-GCA经双酶切和PCR扩增及测序鉴定证实，克隆基因BCG-Ag85B信号肽和GCA正确插入载体pMV261。
结论重组质粒可望在BCG中分泌性表达，该质粒的构建为改造BCG、发展新型抗EB病毒相关肿瘤疫苗奠定了基础。
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