人可溶性血管内皮细胞生长因子（VEGF）受体Flt—1基因在甲醇酵母中的克隆表达

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【摘要】

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应用RT－PCR技术，从人脐静脉内皮细胞中扩增出编码Flt-1，胞外区前四个结构域的基因片段，将Flt-1基因片段连接到表达载体PIC9K上，获得重组质粒pPIC9K-F，将重组质粒转化到甲醇酵母Pich

【作者】

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姜自彬王丽非李元

【机构】

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中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所

【出处】

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药物生物技术

【发表日期】

：

2002年3期

【关键词】

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血管内皮细胞生长因子可溶性受体Flt-1 甲醇酵母基因表达逆反转聚合酶链式反应 Soluble receptor Flt-1 Pichia pasto

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目,项目编号30070023

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应用RT－PCR技术，从人脐静脉内皮细胞中扩增出编码Flt-1，胞外区前四个结构域的基因片段，将Flt-1基因片段连接到表达载体PIC9K上，获得重组质粒pPIC9K-F，将重组质粒转化到甲醇酵母Pichia pastoris GS115中，得到基因工程菌株P.pastoris(pPIC9K-F)，对培养上清进行SDS－PAGE和Western blot分析。结果显示在74.2ku处有阳性条带出现，表明sFLT-1在甲醇酵母中获得了成功表达。受体配基结合实际显示表达产物与VEGF可特异性结合，表明其具有配

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