重组人骨形态发生蛋白2在CHO细胞中的表达、鉴定及活性分析

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tsks1848

【摘要】

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构建真核表达载体pCDNA3．1（＋）-hBMP-2，与质粒pSV2-dhfr共转染CHO-dhfr-细胞，以含有700μg／mLG418的IMDM进行选择性培养，筛选抗性克隆，并用MTX扩增，提高rhBMP-2的表达量。收集的rhBMP-2

【作者】

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张道永杨爽吕树军闫继东朱天慧

【机构】

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南开大学医学院分子遗传学实验室,南开大学生物活性材料教育部重点实验室

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2006年6期

【关键词】

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人骨形态发生蛋白2 CHO 共转染 C2C12 碱性磷酸酶 human bone morphogenetic protein 2 CHO co-transf

【基金项目】

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天津市自然科学基金资助（No.05YFJMJC01800）.

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构建真核表达载体pCDNA3．1（＋）-hBMP-2，与质粒pSV2-dhfr共转染CHO-dhfr-细胞，以含有700μg／mLG418的IMDM进行选择性培养，筛选抗性克隆，并用MTX扩增，提高rhBMP-2的表达量。收集的rhBMP-2蛋白进行Westem blot检测，还原蛋白样品电泳产生一条大小约为18kD的特异性条带，非还原蛋白样品电泳产生一条大小约为30kD的特异性条带，提示表达的rhBMP-2是经过糖基化修饰的，且以同源二聚体形式分泌表达。单细胞分离培养得到14株rCHO（hBMP-2）单

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