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赵悦
130021吉林省中医院
摘 要 目的:观察心血通胶囊对家兔血小板聚集性的影响。方法:采用正常家兔富含血小板的血浆,以5’-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)为促凝剂,通过血小板聚集仪观测血小板聚集曲线,以血小板凝集1分钟(PAG1)、5分钟(PAG5)和最大峰值(PAGM)为观测指标,比较给药各组与空白对照组(生理盐水)血小板聚集率。结果:与对照组比较,心血通胶囊体外120mg/ml和60mg/ml在1min、3min、5min测试点上血小板聚集率明显小于对照组。结论:心血通胶囊体外给药对ADP所致的血小板聚集有明显的抑制作用。
关键词 心血通胶囊 血小板聚集率
资料与方法
动物:Wistar大鼠,雌雄兼用,体重250~270g。由长春高新医学动物实验研究中心提供。
药品与试剂:心血通胶囊,长春中医学院附属医院新药中心提供,规格0.3g/粒,含生药7.5g,批号050410。冠心丹参胶囊,规格0.3g/粒,长春海王生物制药有限责任公司,批号050820。戊巴比妥鈉,上海化学试剂分装厂,批号20030612。肝素,上海卫辉试剂厂,批号20021010。
仪器:TYXN-96多功能血液凝集仪(上海通用机电技术研究所)。
富含血小板血浆(PRP)的制备:实验时取家兔动脉血,以3.8%枸缘酸钠抗凝(9∶1),混匀。分装于试管中,自动平衡离心机,1000转/分离心5~8分钟(20~25℃条件下),用取样器,小心吸取上层液,即富含血小板血浆(PRP),室温下放置备用。
受试药品的准备:心血通胶囊:分别配制成12%的混悬液,超声震荡充分溶解,用双层滤纸过滤。滤液再用0.45μm微孔滤膜抽滤,备用。
血小板促凝剂的准备:用1/10000天秤精确称取ADP5mg,用PH 7.4的0.2M磷酸盐缓冲液溶解,最终配制成浓度为2uM。
测试步骤:TYXN-96多功能血液凝集仪开机后预热。用移液器取富含血小板血浆(PRP)液200μl,注入测试杯中(杯中预先放置搅拌珠)。将测试杯放入预热孔中预热。用微量注射器抽取ADP11μl备用。将测试杯放入检测孔内,启动检测键,同时加入ADP。自动记录血小板凝集曲线。
各组样品的测试:实验共分5组,每组测试10例。试验时每测试管中加入过滤液10μl(分别含心血通胶囊120mg/ml、60mg/ml、30mg/ml),加样体积均为10μl, 对照组加入同体积生理盐水。
观察指标及统计学处理:观察1分钟血小板聚集性(PAG-1),5分钟血小板聚集性(PAG-5)和血小板聚集性最大峰值(PAG-M)。分别统计各组样本1分钟血小板聚集性(PAG-1),5分钟血小板聚集性(PAG-5)和血小板聚集性最大峰值(PAG-M)。组间差异的显著性检验用t检验。
结果
与对照组比较,心血通胶囊体外120mg/ml和60mg/ml在1分钟、3分钟、5分钟测试点上血小板聚集率明显小于对照组,提示心血通胶囊体外给药对ADP所致的血小板聚集均有明显的抑制作用。
讨论
本实验采用正常家兔富含血小板的血浆,以5’-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)为促凝剂,通过血小板聚集仪观测血小板聚集曲线,以血小板凝集1分钟(PAG1)、5分钟(PAG5)和最大峰值(PAGM)为观测指标,比较给药各组与空白对照组(生理盐水)血小板聚集率。结果与对照组比较,心血通胶囊体外120mg/ml和60mg/ml在1分钟、3分钟、5分钟测试点上血小板聚集率明显小于对照组。提示心血通胶囊体外给药对ADP所致的血小板聚集有明显的抑制作用。
参考文献
1 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1993:581.
130021吉林省中医院
摘 要 目的:观察心血通胶囊对家兔血小板聚集性的影响。方法:采用正常家兔富含血小板的血浆,以5’-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)为促凝剂,通过血小板聚集仪观测血小板聚集曲线,以血小板凝集1分钟(PAG1)、5分钟(PAG5)和最大峰值(PAGM)为观测指标,比较给药各组与空白对照组(生理盐水)血小板聚集率。结果:与对照组比较,心血通胶囊体外120mg/ml和60mg/ml在1min、3min、5min测试点上血小板聚集率明显小于对照组。结论:心血通胶囊体外给药对ADP所致的血小板聚集有明显的抑制作用。
关键词 心血通胶囊 血小板聚集率
资料与方法
动物:Wistar大鼠,雌雄兼用,体重250~270g。由长春高新医学动物实验研究中心提供。
药品与试剂:心血通胶囊,长春中医学院附属医院新药中心提供,规格0.3g/粒,含生药7.5g,批号050410。冠心丹参胶囊,规格0.3g/粒,长春海王生物制药有限责任公司,批号050820。戊巴比妥鈉,上海化学试剂分装厂,批号20030612。肝素,上海卫辉试剂厂,批号20021010。
仪器:TYXN-96多功能血液凝集仪(上海通用机电技术研究所)。
富含血小板血浆(PRP)的制备:实验时取家兔动脉血,以3.8%枸缘酸钠抗凝(9∶1),混匀。分装于试管中,自动平衡离心机,1000转/分离心5~8分钟(20~25℃条件下),用取样器,小心吸取上层液,即富含血小板血浆(PRP),室温下放置备用。
受试药品的准备:心血通胶囊:分别配制成12%的混悬液,超声震荡充分溶解,用双层滤纸过滤。滤液再用0.45μm微孔滤膜抽滤,备用。
血小板促凝剂的准备:用1/10000天秤精确称取ADP5mg,用PH 7.4的0.2M磷酸盐缓冲液溶解,最终配制成浓度为2uM。
测试步骤:TYXN-96多功能血液凝集仪开机后预热。用移液器取富含血小板血浆(PRP)液200μl,注入测试杯中(杯中预先放置搅拌珠)。将测试杯放入预热孔中预热。用微量注射器抽取ADP11μl备用。将测试杯放入检测孔内,启动检测键,同时加入ADP。自动记录血小板凝集曲线。
各组样品的测试:实验共分5组,每组测试10例。试验时每测试管中加入过滤液10μl(分别含心血通胶囊120mg/ml、60mg/ml、30mg/ml),加样体积均为10μl, 对照组加入同体积生理盐水。
观察指标及统计学处理:观察1分钟血小板聚集性(PAG-1),5分钟血小板聚集性(PAG-5)和血小板聚集性最大峰值(PAG-M)。分别统计各组样本1分钟血小板聚集性(PAG-1),5分钟血小板聚集性(PAG-5)和血小板聚集性最大峰值(PAG-M)。组间差异的显著性检验用t检验。
结果
与对照组比较,心血通胶囊体外120mg/ml和60mg/ml在1分钟、3分钟、5分钟测试点上血小板聚集率明显小于对照组,提示心血通胶囊体外给药对ADP所致的血小板聚集均有明显的抑制作用。
讨论
本实验采用正常家兔富含血小板的血浆,以5’-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)为促凝剂,通过血小板聚集仪观测血小板聚集曲线,以血小板凝集1分钟(PAG1)、5分钟(PAG5)和最大峰值(PAGM)为观测指标,比较给药各组与空白对照组(生理盐水)血小板聚集率。结果与对照组比较,心血通胶囊体外120mg/ml和60mg/ml在1分钟、3分钟、5分钟测试点上血小板聚集率明显小于对照组。提示心血通胶囊体外给药对ADP所致的血小板聚集有明显的抑制作用。
参考文献
1 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1993:581.