论文部分内容阅读
以高效原核表达载体pColdTF为载体骨架，应用PCR、限制性酶切、连接等分子生物学方法，将pColdTF中的六聚组氨酸（His-Tag）序列替换为限制性酶切位点SpeI序列ACTAGT，构建不合His-Tag序列的新载体pL118．以此载体表达蛋白时，通过PCR引物在目的基因3’端添加His—Tag以利于融合蛋白的纯化以及融合蛋白中的TriggerFae—tor（TF）助溶蛋白的去除．应用pLll8对人膜蛋白CD81进行原核表达与纯化，并使用Fac-torXa蛋白酶去除CD81融合蛋白中的TF助溶蛋白，