【摘 要】
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目的:探讨亚甲基四氢叶酸脱氢酶2（Methylene Tetrahydrofolate Dehydrogenase 2,MTHFD2）在冬凌草素诱导人肝癌细胞HepG2细胞凋亡中的作用及其机制。方法:通过冬凌草甲素处理HepG2细胞24 h,蛋白质免疫印迹技术检测MTHFD2、Ras基因（Ras）、磷酸激酶B（Akt）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、胞外调节蛋白激酶（ERK）、胞外调节蛋白激酶磷
【基金项目】
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国家级大学生创新创业训练计划项目（201911834007）； 河南省创新型科技团队——河南省区域性中药抗肿瘤活性研究创新型科技团队（豫科人组【2017】1号）；
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目的:探讨亚甲基四氢叶酸脱氢酶2（Methylene Tetrahydrofolate Dehydrogenase 2,MTHFD2）在冬凌草素诱导人肝癌细胞HepG2细胞凋亡中的作用及其机制。方法:通过冬凌草甲素处理HepG2细胞24 h,蛋白质免疫印迹技术检测MTHFD2、Ras基因（Ras）、磷酸激酶B（Akt）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、胞外调节蛋白激酶（ERK）、胞外调节蛋白激酶磷酸化（p-ERK）和C-Myc癌基因（c-Myc）蛋白的表达;以酶联免疫吸附剂测定（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）试剂盒检测MTHFD2的酶活性;采用Annexin V-FITC/碘化丙啶凋亡检测试剂盒检测凋亡比例;Giemsa染色观察细胞克隆;通过分子对接研究MTHFD2与冬凌草甲素可能的结合模型。结果:冬凌草甲素对MTHFD2的抑制呈剂量依赖性;MTHFD2的抑制引起线粒体活性氧物质（Reactive Oxygen Species,ROS）升高,表现为线粒体ROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸（N-Acetyl-L-Cysteine,NAC）的处理使细胞克隆形成和细胞凋亡比例逆转;冬凌草甲素通过Ras、p-Akt和c-Myc抑制MTHFD2。结论:冬凌草甲素通过Ras-Akt-Myc信号通路抑制MTHFD2,介导线粒体ROS升高,从而导致HepG2细胞凋亡。
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