【摘 要】
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目的通过体外高糖培养小鼠肾小球足细胞，检测Notch胞内域1(NICD1)的表达与肾小球足细胞凋亡的关系并了解其他信号通路是否介导高糖对Notch通路的激活，以探讨治疗糖尿病肾病的潜在方向。方法高糖培养小鼠足细胞，于刺激0、12、24、48、72 h后收集细胞，检测NICD1蛋白表达情况。将细胞分为7组：正糖组、高糖组、高糖＋γ分泌酶抑制剂(GSI，抑制NICD1活化)组、高糖＋p38细胞分裂素活
【机 构】
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目的通过体外高糖培养小鼠肾小球足细胞，检测Notch胞内域1(NICD1)的表达与肾小球足细胞凋亡的关系并了解其他信号通路是否介导高糖对Notch通路的激活，以探讨治疗糖尿病肾病的潜在方向。
方法高糖培养小鼠足细胞，于刺激0、12、24、48、72 h后收集细胞，检测NICD1蛋白表达情况。将细胞分为7组：正糖组、高糖组、高糖＋γ分泌酶抑制剂(GSI，抑制NICD1活化)组、高糖＋p38细胞分裂素活化蛋白激酶抑制剂组、高糖＋Janus激酶2抑制剂组、高糖＋转化生长因子β1Ⅰ型受体抑制剂组和高糖＋磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B抑制剂组。分别采用免疫细胞化学和Western blotting法检测NICD1的表达，流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)观察足细胞凋亡情况。两组间数据比较采用t检验，多组间数据比较采用单因素方差分析。
结果高糖培养足细胞NICD1蛋白较正糖组(0.079±0.010)增加，12 h开始增加(0.443±0.075)，48 h达峰(0.746±0.034)，72 h略下降(0.658±0.056, F＝6.235, P<0.01)。流式细胞术及TUNEL显示48 h时足细胞凋亡率升高，给予GSI后抑制NICD1的活化及足细胞凋亡(P<0.01)；给予Janus激酶2(0.193±0.096)和转化生长因子β1Ⅰ型受体抑制剂(0.225±0.067)可抑制高糖对NICD1蛋白的活化(t＝6.781、4.287，均P<0.01)。
结论高糖通过Notch通路诱导足细胞凋亡，高糖对Notch通路的激活可能通过Janus激酶/转录激活因子和转化生长因子β1/Smad通路。
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