【摘 要】
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目的克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G,HLA-G)突变体cDNA,并使其在HLA-Ⅰ类阴性的K562细胞上获得稳定表达,为研究配-受体之间的识别机制奠定基础.方法用RT-P
【机 构】
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上海第二医科大学上海市免疫学研究所
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目的克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G,HLA-G)突变体cDNA,并使其在HLA-Ⅰ类阴性的K562细胞上获得稳定表达,为研究配-受体之间的识别机制奠定基础.方法用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-G cDNA,得到全长HLA-G PCR产物后,用桥式PCR方法进行定点点突变,将突变的目的基因亚克隆于逆转录,将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体,采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞,最后经G418筛选及有限稀释,利用单克隆抗体W
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