重组李斯特菌细胞溶解素LLO蛋白表达纯化及溶血活性鉴定

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:eyeryonecheat
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目的克隆单核细胞增生症李斯特菌细胞溶解素O(LLO)基因hlyA,构建其原核表达系统,鉴定融合蛋白LLO的抗原性和溶血活性.方法采用PCR技术从Lm总DNA中扩增hlyA基因,与基因库中其它9株hlyA基因序列相比较.用pET30a载体构建LLO原核表达质粒pET30a-hlyA,在E.coli BL21(DE3)宿主菌中用IPTG诱导表达,Ni2+柱纯化后,Western blot鉴定其抗原性.用人红细胞检测溶血活性.结果所克隆的hlyA基因PEST样结构与GenBank上9个菌株的相应氨基酸序列相比,
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