【摘 要】
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目的以人apoE7基因制备的高脂血症转基因小鼠模型已建成,要用于探查这一突变基因致病的分子机制,首先揭示人apoE7在小鼠体内诱发了那些基因的表达异常,是重要的环节之一.cDNA
【机 构】
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中国医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学室
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目的以人apoE7基因制备的高脂血症转基因小鼠模型已建成,要用于探查这一突变基因致病的分子机制,首先揭示人apoE7在小鼠体内诱发了那些基因的表达异常,是重要的环节之一.cDNA削减文库是寻找异常高表达的已知和未知基因有效的手段,而cDNA文库更是获取全长基因所必须.方法自正常小鼠与转基因小鼠肾脏同时提取总RNA,再分离mRNA,逆转录制备cDNA后,用两次分子杂交削除转基因鼠cDNA中与正常小鼠相同的部分,再用PCR与择需PCR法扩增转基因鼠特异的基因,克隆入pGEM-T载体后,制备削减文库.未经削减的
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