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以犬2型腺病毒全基因组重组质粒pPolyⅡ-CAV-2为基础，通过NcoI和MluI双酶切、Klenow补平，构建了不含外源启动子、大小为979bp的增强绿色荧光蛋白（EGFP）基因；通过MluI和EcoRI双酶切将含有犬2型腺病毒的Ⅸ蛋白的340bp的片段克隆入pEGFP—C1一dAseI质粒中，构建pEGFP—SIX载体，通过AseI单酶切插入EGFP，即在编码Ⅸ蛋白基因的最后密码子与终止密码子之间按与Ⅸ蛋白编码链相同转录方向插入EGFP基因，获得重组基因组质粒pPolyⅡ—CAV-2-IXE（34．