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建立了用于水和鱼体中精草铵膦残留检测的柱前衍生-高效液相色谱法。水样经水合柠檬酸三钠处理后加9-芴甲基氯甲酸酯进行衍生化，鱼样以水为提取剂，提取液经9-芴甲基氯甲酸酯衍生化处理；衍生化反应液经二氯甲烷净化；进一步通过优化色谱分离条件，采用荧光检测器，建立柱前衍生-高效液相色谱检测法，外标法定量。水样中添加浓度为0.01～1.50 mg·L-1时，平均回收率为100.8%～102.3%,相对标准偏差为0.8%～4.1%;鱼体中添加浓度为0.01～1.00 mg·kg-1时，平均回收率为82.5%～101.6%,相对标准偏差为2.3%～6.2%。方法最小定量限为鱼体0.01 mg·kg-1、水0.01 mg·L-1。建立的柱前衍生-高效液相色谱法，可以对水样和鱼体中精草铵膦农药残留的高灵敏准确分析，达到农药残留分析测试要求。