【摘 要】
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目的将绵羊端粒逆转录酶（TERT）基因表达载体pcDNA3.1-EGFP-TERT转入绵羊骨髓间充质干细胞（BMSCs）中,进一步研究TERT在BMSCs永生化过程中的作用。方法用RT-PCR技术扩增出带EcoRⅠ
【机 构】
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内蒙古医科大学附属医院重症医学科,内蒙古医科大学附属医院附属医院肾内科,内蒙古医科大学基础医学院分子生物学研究中心
【基金项目】
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内蒙古自治区自然科学基金面上项目(2013MS-1195)
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目的将绵羊端粒逆转录酶（TERT）基因表达载体pcDNA3.1-EGFP-TERT转入绵羊骨髓间充质干细胞（BMSCs）中,进一步研究TERT在BMSCs永生化过程中的作用。方法用RT-PCR技术扩增出带EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的TERT基因,连接到pcDNA3.1-EGFP真核表达载体。脂质体转染到BMSCs中,G418筛选出转染成功细胞,进行传代培养、生长曲线的测定以及遗传稳定性分析。结果扩增得到的TERT基因cDNA全长为1 866bp,转染BMSCs以后传至第40代时,核型分析正常率为77.
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