【摘 要】
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目的制备兔抗长爪沙鼠免疫球蛋白G1（IgG1）和IgG2的特异性多克隆抗体，并用于蛋白质免疫印迹（WB）和ELISA检测。方法利用质粒-大肠埃希菌系统分别高效表达密码子优化的长爪沙鼠免疫球蛋白IgG1和IgG2重链恒定域CH2和CH3重组蛋白，纯化后免疫新西兰大白兔，分离并纯化获得相应的兔多克隆抗体，用辣根过氧化物酶（HRP）标记后分别作为一抗应用于WB和作为二抗应用ELISA。结果IgG1和Ig
【机 构】
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中国科学院肿瘤与基础医学研究所，中国科学院大学附属肿瘤医院，浙江省肿瘤医院检验科，杭州 310022,杭州医学院病毒病研究所，杭州 310013,中国科学院肿瘤与基础医学研究所，中国科学院大学附属肿瘤
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目的制备兔抗长爪沙鼠免疫球蛋白G1（IgG1）和IgG2的特异性多克隆抗体，并用于蛋白质免疫印迹（WB）和ELISA检测。
方法利用质粒-大肠埃希菌系统分别高效表达密码子优化的长爪沙鼠免疫球蛋白IgG1和IgG2重链恒定域CH2和CH3重组蛋白，纯化后免疫新西兰大白兔，分离并纯化获得相应的兔多克隆抗体，用辣根过氧化物酶（HRP）标记后分别作为一抗应用于WB和作为二抗应用ELISA。
结果IgG1和IgG2重组蛋白在大肠埃希菌中可高效表达并都以包涵体形式存在，I相对分子质量分别为24 800和21 200，与预期相符。其纯化后作为免疫原可诱导兔产生相应的多克隆抗体，HRP标记后用于WB可以特异性地识别重组蛋白长爪沙鼠IgG1-CH23和IgG2-CH23，用于ELISA能检测柯萨奇病毒A16型感染长爪沙鼠后诱导产生的特异性IgG抗体。
结论成功制备了兔抗长爪沙鼠免疫球蛋白IgG1和IgG2的特异性多克隆抗体，为长爪沙鼠特异性抗体血清学检测提供了有效工具。
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