论文部分内容阅读
摘要：在我国每年约有2000万新生儿出生，其中20-30万新生儿为肉眼可识别的先天性畸形儿;而每年新增120万先天性残疾与智障儿童，以上数据意味着每隔30-40秒即会降生1个出生缺陷儿，约占每年出生新生儿人口的4-6%[1]。世界卫生组织提出预防出生缺陷儿出现包括三级预防，其中一级预防指预防发生，降低出生缺陷率;二级预防指避免出生;三级预防指避免出生缺陷儿致残率，减轻疾病负担;由此可见产前筛查与产前诊断检测技术对降低出生缺陷儿出生率意义重大[2-3]。文章就产前筛查及产前诊断检测技术研究进展做一综述报道如下：
关键词：产前筛查;产前诊断;检测;出生缺陷
【中图分类号】R248.3 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2021）05-110-01
产前筛查及产前诊断检测技术最早出现在20世纪60年代的国外，目前在全世界围产科学领域获得广泛应用，我国卫生部于2010年推出《胎儿染色体异常的细胞遗传学产前诊断技术标准》[4]，产前诊断的指征包括高龄孕妇、产前筛查显示胎儿染色体异常高风险孕妇、孕妇曾经生育过染色体病患儿、产前B超结果提示胎儿可能伴随染色体异常、父母中一方携带异常染色体等[5]。文章就产前筛查及产前诊断检测技术研究进展做一综述报道如下：
1.产前筛查
1.1 血清学筛查
血清学筛查指对孕妇血液中的激素与相关蛋白检测，结合孕妇身体健康状态，结合软件技术筛查遗传性疾病、先天畸形的高风险孕妇，提高诊断准确性，降缺陷儿出生率。常见的血清学筛查项目包括甲胎蛋白（AFP）、妊娠相关蛋白A（PAPP-A）、抑制素A（Inh-A）、绒毛膜促性腺激素（β-HCG）、游离雌三醇（uE3）等[6]。
1.2 B超检查
产科中最广泛应用的检查方式即为B超，主要应用优势包括：可直观监测胎儿生长发育情况、观察是否存在异常形态的胎儿;确认孕周;可用于脐带穿刺、介导绒毛膜取样、羊膜腔穿刺术;获得 颈部皱褶（NF）与颈项透明层（NT）指标，初步评估唐氏综合征（DS）风险[7]。临床提出孕10-14周即可检测NT，如NT值>3mm则提示存在DS高危妊娠，可提高孕早期DS检出率。孕16-24周时可筛查NF，如NF厚度>5mm，则考虑为DS高危妊娠[8]。由此可见，超声检查具有无创特点，在产前筛查中占据重要地位，但单一依靠超声检查作为诊断依据存在一定局限性，如在孕晚期超声检查无法穿越胎儿颅骨、组织，影响显示效果。
1.3 胎儿磁共振检查
磁共振检查技术特点包括无电离辐射、高分辨率、检查未受羊水量与胎儿骨骼影响，可较好显示孕晚期羊水量、胎头位置、双胎等，具有较大的视野，可显示胎儿全貌，疾病诊断中可用于诊断胎儿颈胸部、盆腔、中枢神经系统、腹部等病变部位，且准确性高，具有良好的分辨率与直观性，可作为胎儿超声检查的辅助补充手段，但磁共振检查也存在一定不足之处，如费用高昂、检查时间长、诊断胎儿四肢、心脏效果相对较差[9]。
2.产前诊断
2.1 分析胎儿染色体核型
胎儿染色体核型是目前临床应用最广泛的产前诊断技术，包括羊膜腔穿刺、脐静脉穿刺、绒毛活检技术等，展开分析胎儿染色体核型，指抽取孕6-9周绒毛、18-24周羊水、孕24周后的脐静脉血分析胎儿染色体，具有较高的诊断准确性，且结果可靠，也成为产前诊断的金标准[10]。但该方法也存在一定缺陷，如有创性、可能增加流产、早产、宫内感染风险，培养失败引起部分流产样本无法报告，存在因母源细胞污染导致的假阴性情况;且操作过程繁琐、诊断周期时间长等[11]。
2.2 CNV_seq 技术
CNV_seq 技术是一种染色体拷贝数变异检测技术，是建立在高通量测序技术基础上发展而来，应用优势包括检查成本低、不需要培养细胞、短时间即可获取报告、具有高通量特点，4h内即可完成96个样本建库，操作步骤简单，需要的样本量少，仅需要1ml羊水样本即可进行1次检测[12]。CNV_seq 技术几乎可以反映所有胎儿染色体核型信息，并且可了解核型无法发现的相关遗传疾病，但也无法发现所有的遗传病，可识别血缘关系但并不可作为亲子鉴定。
2.3 全外显子组测序（WES）
WES可诊断多种罕见疾病，在临床应用优势较大，且花费相对较低，传统序列基因检测中，患者此前需要无信息诊断，需要花费数年时间，寻求诊断时间持续长，且可能存在侵入性程序，产生医疗风险。而随着临床不断发展序列分析方法，不断增加被识别的基因数量，但这些基因的表型特征尚未完全表现，临床特征不明显。
2.4 間期荧光原位杂交
传统通过分析培养细胞的全核型进行检测，目前临床应用的快速检测方法无需培养细胞，可直接检测羊水、绒毛膜绒毛样本中的细胞，一般情况下可在获得样本后48h内取得结果。一些遗传实验室选择间期荧光原位杂交方法是因为具有现成的设备与技术，临床已经广泛开展基于定量荧光（QF）- pcr 的方法，可作为一种临床诊断服务。
3.小结
核型分析的金标准是细胞遗传学技术，通过该技术可诊断染色体结构改变、诊断细胞整组染色体异常数目，但受到显带分辨率限制，仅能观察到长度>10Mb的结构变异。产前筛查与产前诊断各项检测方法均各有优势，血清学产前筛查结果显示高危的孕妇需要接受医生指导，结合具体情况选择进一步的产前诊断，进一步降低缺陷儿出生率，提高人口质量。
目前我国产前筛查、诊断工作中依然存在问题，包括针对产前筛查结果显示高危的孕妇在进行进一步的分析羊水细胞后，也仅能发现5%左右的染色体异常情况，而部分患者可能因产前筛查假阴性结果而延误诊治，同时也受到临床医疗资源限制，导致孕妇无法在最佳时机进行羊水细胞染色体分析，同时虽然临床应用无创产前筛查准确性较高，但无法对先天性神经管缺陷进行检测，且花费较高，因此无法取代血清学筛查技术。近年来随着我国不断发展新的产前筛查与诊断技术，多种分子生物学、细胞遗传学、基因测序技术等不断涌现，但每个技术均存在自身的局限性，因此正确选择适宜的产前筛查与诊断技术对降低缺陷儿出生率意义重大。 参考文献：
[1] 陈丽媛，徐咏，王辉，等. Turner综合征无创产前检测准确性和妊娠选择的临床分析[J]. 中国计划生育学杂志，2021，29（4）：842-848.
[2] 卜秀芬，曾黎，李红玉，等. 染色体微阵列分析对于无创产前检测提示异常的孕妇的诊断价值[J]. 中华医学遗传学杂志，2021，38（6）：541-544.
[3] 齐政，翟春雅，袁碧波. 无创产前检测在性染色体疾病筛查中的研究进展[J]. 中国计划生育学杂志，2021，29（5）：1072-1076.
[4] 侯伟，周红辉，谢潇潇，等. 无创产前检测适用人群的探讨及其临床应用评价[J]. 解放军医学院学报，2021，42（3）：246-250.
[5] 杨丽，腊晓琳，加米拉·热扎克，等. 无创产前DNA检测技术在胎儿性染色体异常筛查中的应用价值[J]. 国际遗传学杂志，2021，44（2）：79-84.
[6] 景亚玲，刘晓芳，陈俭辉，等. 无创产前基因检测在血清学筛查风险值异常及高龄孕妇中的应用[J]. 贵州医科大学学报，2021，46（2）：204-209.
[7] 朱若男，时盼来，赵军红，等. 20 038例羊水染色体核型与不同产前诊断指征关系的分析[J]. 中华医学遗传学杂志，2021，38（3）：300-302.
[8] YIN， LIANLI， TANG， YINGHUA， LU， QING， et al. Application of Non-Invasive Prenatal Tests in Serological Preclinical Screening for Women with Critical-Risk and Low-Risk Pregnancies but Abnormal Multiple of the Median Values[J]. Clinical laboratory，2020，66（7）：1365-1371.
[9] 蔡腾，纪亚梅. 孕早期、孕中期产前超声对胎儿中枢神经系统畸形的筛查价值[J]. 影像科学与光化学，2020，38（6）：1047-1051.
[10] 刘艳华，李洁. 无创产前基因检测在产前筛查风险人群中的应用[J]. 中国计划生育学杂志，2020，28（10）：1698-1701.
[11] 杨云帆，王彦林，高佳琪，等. 新筛查模式下高龄孕妇产前诊断指针的再评价[J]. 中华医学遗传学杂志，2020，37（10）：1057-1060.
[12] 陳艺升，仉英，应春妹. 无创产前基因检测在产前一线筛查中的应用价值[J]. 中华检验医学杂志，2019，42（2）：112-115.
关键词：产前筛查;产前诊断;检测;出生缺陷
【中图分类号】R248.3 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2021）05-110-01
产前筛查及产前诊断检测技术最早出现在20世纪60年代的国外，目前在全世界围产科学领域获得广泛应用，我国卫生部于2010年推出《胎儿染色体异常的细胞遗传学产前诊断技术标准》[4]，产前诊断的指征包括高龄孕妇、产前筛查显示胎儿染色体异常高风险孕妇、孕妇曾经生育过染色体病患儿、产前B超结果提示胎儿可能伴随染色体异常、父母中一方携带异常染色体等[5]。文章就产前筛查及产前诊断检测技术研究进展做一综述报道如下：
1.产前筛查
1.1 血清学筛查
血清学筛查指对孕妇血液中的激素与相关蛋白检测，结合孕妇身体健康状态，结合软件技术筛查遗传性疾病、先天畸形的高风险孕妇，提高诊断准确性，降缺陷儿出生率。常见的血清学筛查项目包括甲胎蛋白（AFP）、妊娠相关蛋白A（PAPP-A）、抑制素A（Inh-A）、绒毛膜促性腺激素（β-HCG）、游离雌三醇（uE3）等[6]。
1.2 B超检查
产科中最广泛应用的检查方式即为B超，主要应用优势包括：可直观监测胎儿生长发育情况、观察是否存在异常形态的胎儿;确认孕周;可用于脐带穿刺、介导绒毛膜取样、羊膜腔穿刺术;获得 颈部皱褶（NF）与颈项透明层（NT）指标，初步评估唐氏综合征（DS）风险[7]。临床提出孕10-14周即可检测NT，如NT值>3mm则提示存在DS高危妊娠，可提高孕早期DS检出率。孕16-24周时可筛查NF，如NF厚度>5mm，则考虑为DS高危妊娠[8]。由此可见，超声检查具有无创特点，在产前筛查中占据重要地位，但单一依靠超声检查作为诊断依据存在一定局限性，如在孕晚期超声检查无法穿越胎儿颅骨、组织，影响显示效果。
1.3 胎儿磁共振检查
磁共振检查技术特点包括无电离辐射、高分辨率、检查未受羊水量与胎儿骨骼影响，可较好显示孕晚期羊水量、胎头位置、双胎等，具有较大的视野，可显示胎儿全貌，疾病诊断中可用于诊断胎儿颈胸部、盆腔、中枢神经系统、腹部等病变部位，且准确性高，具有良好的分辨率与直观性，可作为胎儿超声检查的辅助补充手段，但磁共振检查也存在一定不足之处，如费用高昂、检查时间长、诊断胎儿四肢、心脏效果相对较差[9]。
2.产前诊断
2.1 分析胎儿染色体核型
胎儿染色体核型是目前临床应用最广泛的产前诊断技术，包括羊膜腔穿刺、脐静脉穿刺、绒毛活检技术等，展开分析胎儿染色体核型，指抽取孕6-9周绒毛、18-24周羊水、孕24周后的脐静脉血分析胎儿染色体，具有较高的诊断准确性，且结果可靠，也成为产前诊断的金标准[10]。但该方法也存在一定缺陷，如有创性、可能增加流产、早产、宫内感染风险，培养失败引起部分流产样本无法报告，存在因母源细胞污染导致的假阴性情况;且操作过程繁琐、诊断周期时间长等[11]。
2.2 CNV_seq 技术
CNV_seq 技术是一种染色体拷贝数变异检测技术，是建立在高通量测序技术基础上发展而来，应用优势包括检查成本低、不需要培养细胞、短时间即可获取报告、具有高通量特点，4h内即可完成96个样本建库，操作步骤简单，需要的样本量少，仅需要1ml羊水样本即可进行1次检测[12]。CNV_seq 技术几乎可以反映所有胎儿染色体核型信息，并且可了解核型无法发现的相关遗传疾病，但也无法发现所有的遗传病，可识别血缘关系但并不可作为亲子鉴定。
2.3 全外显子组测序（WES）
WES可诊断多种罕见疾病，在临床应用优势较大，且花费相对较低，传统序列基因检测中，患者此前需要无信息诊断，需要花费数年时间，寻求诊断时间持续长，且可能存在侵入性程序，产生医疗风险。而随着临床不断发展序列分析方法，不断增加被识别的基因数量，但这些基因的表型特征尚未完全表现，临床特征不明显。
2.4 間期荧光原位杂交
传统通过分析培养细胞的全核型进行检测，目前临床应用的快速检测方法无需培养细胞，可直接检测羊水、绒毛膜绒毛样本中的细胞，一般情况下可在获得样本后48h内取得结果。一些遗传实验室选择间期荧光原位杂交方法是因为具有现成的设备与技术，临床已经广泛开展基于定量荧光（QF）- pcr 的方法，可作为一种临床诊断服务。
3.小结
核型分析的金标准是细胞遗传学技术，通过该技术可诊断染色体结构改变、诊断细胞整组染色体异常数目，但受到显带分辨率限制，仅能观察到长度>10Mb的结构变异。产前筛查与产前诊断各项检测方法均各有优势，血清学产前筛查结果显示高危的孕妇需要接受医生指导，结合具体情况选择进一步的产前诊断，进一步降低缺陷儿出生率，提高人口质量。
目前我国产前筛查、诊断工作中依然存在问题，包括针对产前筛查结果显示高危的孕妇在进行进一步的分析羊水细胞后，也仅能发现5%左右的染色体异常情况，而部分患者可能因产前筛查假阴性结果而延误诊治，同时也受到临床医疗资源限制，导致孕妇无法在最佳时机进行羊水细胞染色体分析，同时虽然临床应用无创产前筛查准确性较高，但无法对先天性神经管缺陷进行检测，且花费较高，因此无法取代血清学筛查技术。近年来随着我国不断发展新的产前筛查与诊断技术，多种分子生物学、细胞遗传学、基因测序技术等不断涌现，但每个技术均存在自身的局限性，因此正确选择适宜的产前筛查与诊断技术对降低缺陷儿出生率意义重大。 参考文献：
[1] 陈丽媛，徐咏，王辉，等. Turner综合征无创产前检测准确性和妊娠选择的临床分析[J]. 中国计划生育学杂志，2021，29（4）：842-848.
[2] 卜秀芬，曾黎，李红玉，等. 染色体微阵列分析对于无创产前检测提示异常的孕妇的诊断价值[J]. 中华医学遗传学杂志，2021，38（6）：541-544.
[3] 齐政，翟春雅，袁碧波. 无创产前检测在性染色体疾病筛查中的研究进展[J]. 中国计划生育学杂志，2021，29（5）：1072-1076.
[4] 侯伟，周红辉，谢潇潇，等. 无创产前检测适用人群的探讨及其临床应用评价[J]. 解放军医学院学报，2021，42（3）：246-250.
[5] 杨丽，腊晓琳，加米拉·热扎克，等. 无创产前DNA检测技术在胎儿性染色体异常筛查中的应用价值[J]. 国际遗传学杂志，2021，44（2）：79-84.
[6] 景亚玲，刘晓芳，陈俭辉，等. 无创产前基因检测在血清学筛查风险值异常及高龄孕妇中的应用[J]. 贵州医科大学学报，2021，46（2）：204-209.
[7] 朱若男，时盼来，赵军红，等. 20 038例羊水染色体核型与不同产前诊断指征关系的分析[J]. 中华医学遗传学杂志，2021，38（3）：300-302.
[8] YIN， LIANLI， TANG， YINGHUA， LU， QING， et al. Application of Non-Invasive Prenatal Tests in Serological Preclinical Screening for Women with Critical-Risk and Low-Risk Pregnancies but Abnormal Multiple of the Median Values[J]. Clinical laboratory，2020，66（7）：1365-1371.
[9] 蔡腾，纪亚梅. 孕早期、孕中期产前超声对胎儿中枢神经系统畸形的筛查价值[J]. 影像科学与光化学，2020，38（6）：1047-1051.
[10] 刘艳华，李洁. 无创产前基因检测在产前筛查风险人群中的应用[J]. 中国计划生育学杂志，2020，28（10）：1698-1701.
[11] 杨云帆，王彦林，高佳琪，等. 新筛查模式下高龄孕妇产前诊断指针的再评价[J]. 中华医学遗传学杂志，2020，37（10）：1057-1060.
[12] 陳艺升，仉英，应春妹. 无创产前基因检测在产前一线筛查中的应用价值[J]. 中华检验医学杂志，2019，42（2）：112-115.