棉花Ghl4-3-3L2基因的分子克隆及其互作蛋白质的初步鉴定

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根据本实验室蛋白质组学研究鉴定的EST序列,克隆了一个可能在棉花纤维起始和伸长发育阶段起调控作用的棉花14—3—3蛋白质的全长cDNA,定名为Gh14-3-3L2。Gh14-3-3L2蛋白毒性大.难以通过酵母双杂交途径鉴定其互作蛋白质组。因此,本研究首先经原核表达并纯化出添加六联组氨酸标签的Gh14—3-3L2蛋白,以此蛋白质为诱饵,以开花前3d至开花后6d正常野生型、徐州142无纤维突变体和Li-1无长绒纤维突变体胚珠或纤维混合蛋白质为猎物样品,采用Pull—down技术分离、富集Gh14-3-3L2相
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