探讨小窝蛋白-1脚手架区结构域（CSD）多肽对脂多糖（LPS）诱导肺泡巨噬细胞（AMs）血红素加氧酶-1（HO-1）活性增加和M1/M2表型极化的影响。
方法应用生物信息学方法分析全长野生型CSD多肽和101位氨基酸缺失的截短型突变CSD多肽（Δ101CSD）与HO-1的结合情况。分离纯化培养大鼠原代AMs，细胞融合达到80%时用无血清培养基进行同步化处理，并分为5组：空白对照组不予任何处理；LPS组加入100 μg/L的LPS处理16 h；LPS +血晶素组加入100 μg/L的LPS和20 μmol/L血晶素处理16 h；野生型CSD多肽+ LPS +血晶素组在LPS处理前6 h加入10 μmol/L野生型CSD多肽预处理；Δ101CSD + LPS +血晶素组在LPS处理前6 h加入10 μmol/L Δ101CSD预处理。各组处理16 h后，激光共聚焦显微镜下观察AMs细胞膜小窝蛋白-1（Cav-1）与HO-1的结合情况；采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）以及AMs的M1型标志物肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和M2型标志物白细胞分化抗原206（CD206）、IL-10的mRNA表达；采用分光光度计检测HO-1活性及一氧化氮（NO）含量。
结果生物信息学分析结果显示：野生型CSD和Δ101CSD多肽均能与HO-1结合，且二者结合能力无明显差异；但101位Arg缺失导致Δ101CSD多肽与HO-1的部分结合区域消失。激光共聚焦显微镜下观察结果显示：空白对照组Cav-1和HO-1均低表达；LPS组和LPS +血晶素组Cav-1与HO-1大量结合；野生型CSD和Δ101CSD多肽均能明显减少LPS诱导的HO-1与Cav-1结合。HO-1活性分析结果显示：给予LPS刺激后，HO-1活性较空白对照组明显升高；血晶素可促进LPS诱导HO-1活性升高；给予两种CSD多肽预处理后，HO-1活性均进一步升高，以野生型CSD多肽作用更加显著，与LPS +血晶素组比较差异有统计学意义（pmol·mg-1·h-1：3 683±266比2 408±132，P<0.05）。RT-qPCR检测结果显示：LPS可诱导细胞炎性因子及M1型标志物水平升高，M2型标志物水平下降；而血晶素可抑制LPS诱导的炎症反应及M1/M2表型极化。与LPS +血晶素组相比，给予野生型CSD多肽预处理后，AMs中炎性因子水平降低，同时可降低M1型标志物TNF-α和iNOS的mRNA表达水平〔TNF-α mRNA（2-∆∆Ct）：6.82±0.05比8.70±0.24，iNOS mRNA（2-∆∆Ct）：331.50±32.05比506.70±0.10，均P<0.05〕，增加M1型标志物IL-10 mRNA的表达水平（2-∆∆Ct：269.09±6.54比119.05±3.30，P<0.05）；而101位缺失部分削弱了CSD多肽对炎性因子的抑制作用，且只能降低iNOS mRNA的表达水平（2-∆∆Ct：429.11±8.92比506.70±0.10，P<0.05），说明其促使AMs由M1表型向M2表型转化的能力较差。两种多肽对CD206的表达均无影响。
结论野生型CSD多肽可减少LPS诱导的Cav-1与HO-1结合、增加HO-1活性，促进AMs由M1表型向M2表型转化，抑制促炎因子表达。