【摘 要】
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目的对人NKp30(hNKp30)进行基因克隆并在大肠埃希菌中重组表达,为进一步研究NK细胞抗肿瘤作用奠定基础。方法提取人外周静脉血单个核细胞,分离纯化外周血总RNA。用PCR扩增hNKp3
【基金项目】
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山东省卫生厅计划课题资助项目(2007HW092).
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目的对人NKp30(hNKp30)进行基因克隆并在大肠埃希菌中重组表达,为进一步研究NK细胞抗肿瘤作用奠定基础。方法提取人外周静脉血单个核细胞,分离纯化外周血总RNA。用PCR扩增hNKp30片段,克隆至质粒载体pMD18-T,对克隆的DNA片段行序列分析。用限制酶XhoI、EcoRI消化pMD18-T-hNKp30重组质粒,分离hNKp30片段,插入真核表达载体pIRES2-EGFP相应限制酶位点,酶谱分析鉴定重组表达载体pIRES2-EG-FP-hNKp30,并转染COS-7细胞。结果PCR扩增DNA
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