【摘 要】
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目的：构建带有GST标签的人NRP－1融合蛋白原核表达载体，在大肠埃希菌（ E．coli）中诱导其表达，并进行包涵体的复性及纯化。方法：利用RT－PCR扩增人NRP－1基因，将其克隆至pCR－blunt载体，酶切制备
【机 构】
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徐州医学院附属医院肿瘤科,徐州医学院附属医院血液科
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目的：构建带有GST标签的人NRP－1融合蛋白原核表达载体，在大肠埃希菌（ E．coli）中诱导其表达，并进行包涵体的复性及纯化。方法：利用RT－PCR扩增人NRP－1基因，将其克隆至pCR－blunt载体，酶切制备NRP－1基因片段，插入表达载体pGEX－4T－1，生成pGEX－4T－1－NRP－1，转入BL21感受态细胞以IPTG诱导其蛋白的表达。裂解细菌后行Western blot检测GST－NRP－1融合蛋白的表达，表达的包涵体经复性后用Glutathione Sepharose 4B纯化。结果：
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