芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆、表达和酶学性质分析

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在仔猪结肠内容物中分离出一株能利用淀粉的芽孢杆菌Bacillus sp. WS06, 构建了全基因组DNA文库,从中筛选出α-淀粉酶基因amyF,分析测定了其核苷酸序列并进行了表达;其中amyF编码的蛋白有526个氨基酸、分子量为58.6kD;它与已报道的Bacillus megaterium的α-淀粉酶序列有93%的同源性.经过氨基酸序列比较分析还发现,AmyF含有淀粉酶家族中4个高度保守的酶催化活性区.经多步纯化,重组酶的比活共提高了22.2 倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品;经SDS-PAGE检测,A
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