【摘 要】
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目的研究下调丝氨酸消旋酶(SRR)缓解β-淀粉样蛋白(Aβ)对PC12细胞的神经毒性、突触损伤作用及其可能机制。方法(1)将体外培养的PC12细胞分为0、20、40、80μmol/LAβ25-35组，分别加入0、20、40、80μmol/LAβ25-35作用24h，采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞存活率，采用Westernblotting实验检测细胞SRR蛋白的表达。用40μmol/LAβ25-35分别处理PC12细胞0、12、24、48h，采用CCK-8法、Westernblotting实
【机 构】
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大连医科大学附属第二医院神经内科，大连 116023大连医科大学附属第二医院神经内科，大连 116023大连医科大学附属第二医院神经内科，大连 116023大连医科大学附属第二医院神经内科，大连 11
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目的研究下调丝氨酸消旋酶(SRR)缓解β-淀粉样蛋白(Aβ)对PC12细胞的神经毒性、突触损伤作用及其可能机制。
方法(1)将体外培养的PC12细胞分为0、20、40、80 μmol/L Aβ25-35组，分别加入0、20、40、80 μmol/L Aβ25-35作用24 h，采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞存活率，采用Western blotting实验检测细胞SRR蛋白的表达。用40 μmol/L Aβ25-35分别处理PC12细胞0、12、24、48 h，采用CCK-8法、Western blotting实验分别检测细胞存活率、SRR蛋白的表达。(2)将PC12细胞分为对照组、无义序列组、SRR小干扰RNA(siRNA) 1组、SRR siRNA 2组、SRR siRNA 3组，后4组细胞分别转染SRR无义序列或不同SRR siRNA序列，48 h后采用Western blotting实验检测细胞SRR蛋白的表达，选择效果最佳的SRR siRNA用于后续实验。(3)将PC12细胞分为对照组、AD组、AD 无义序列组、AD SRR siRNA组，后2组细胞分别瞬时转染无义序列或SRR siRNA，作用48 h，后3组细胞均加入40 μmol/L Aβ25-35，对照组加入等量溶剂。处理24 h后采用Western blotting实验检测细胞SRR蛋白的表达，CCK-8法检测细胞存活率，Hoechst 33258染色检测细胞凋亡，ELISA法检测细胞半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)活性，Western blotting实验检测细胞活化Caspase 3、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体相关蛋白、突触后致密蛋白95(PSD95)的表达。
结果(1)0、20、40、80 μmol/L Aβ25-35组细胞存活率依次降低，SRR蛋白的表达依次增高，差异均有统计学意义(P
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