【摘 要】
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目的探讨重组大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)基因、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因转染兔软骨细胞后生物性状的变化,为骨关节炎基因治疗中目的基因的选择提供参考.方法将体外培养的兔膝关节软骨细胞分为空白组、质粒pcDNA3转染组、pcDNA3+TGF-β1基因转染组、pAT153+IGF-1基因转染组.筛选阳性克隆后,对软骨细胞所分泌的TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原进行原位杂交
【机 构】
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430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,山西医科大学第二医院骨科,
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目的探讨重组大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)基因、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因转染兔软骨细胞后生物性状的变化,为骨关节炎基因治疗中目的基因的选择提供参考.方法将体外培养的兔膝关节软骨细胞分为空白组、质粒pcDNA3转染组、pcDNA3+TGF-β1基因转染组、pAT153+IGF-1基因转染组.筛选阳性克隆后,对软骨细胞所分泌的TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)检测.结果空白组与质粒pcDNA3转染组的上述指标差异无显著性(P＞0.05);基因转染组与空白组、pcDNA3转染组相比,TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原的含量均有明显提高,DNA合成率及各生长周期比例差异有显著性(P＜0.05);pcDNA3+TGF-β1转染组与pAT153+IGF-1转染组相比,上述指标差异也均有显著性(P＜0.05).结论 pcDNA3+TGF-β1、pAT153+IGF-1基因转染后的软骨细胞生物学性状优于未转染组,上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高;pcDNA3+TGF-β1 转染后软骨细胞生物学性状优于pAT153+IGF-1组,在骨关节炎基因治疗中可优先选择TGF-β1基因.
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