【摘 要】
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目的:通过DNA条形码技术对金钱草样品、地方习用品及其常见的混伪品进行研究,比较分析ITS2和rbcL基因的鉴定效率,为金钱草的分子鉴别提供参考依据.方法:采用CTAB法提取12个金
【机 构】
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浙江中医药大学药学院,浙江杭州310053;浙江中医药大学药学院,浙江杭州310053;浙江医药高等专科学校中药学院,浙江 宁波315100;浙江中医药大学第一临床医学院,浙江杭州310006
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目的:通过DNA条形码技术对金钱草样品、地方习用品及其常见的混伪品进行研究,比较分析ITS2和rbcL基因的鉴定效率,为金钱草的分子鉴别提供参考依据.方法:采用CTAB法提取12个金钱草样品、浙江地区习用品种浙金钱草和其他常见的4种混伪品基因组DNA,PCR扩增各样品的ITS2和rbcL基因序列并进行测序,通过对序列的变异位点、种内种间遗传距离和NJ树聚类进行分析,比较两个序列在金钱草种内及其混伪品鉴定中的优劣.结果:金钱草ITS2和rbcL序列的金钱草种内变异位点分别为3和1个,且ITS2在金钱草及其混伪品样品中较rbcL有更丰富的变异位点.基于ITS2和rbcL序列的金钱草与其混伪品间最小种间遗传距离均大于最大种内遗传距离,不存在条形码重叠部分;NJ树聚类分析中金钱草样品聚为一支,与浙金钱草的亲缘关系最近,并能够与其他几种混伪品明显区分.结论:ITS2和rbcL均可用于鉴别金钱草正品与地方习用品及其常见的混伪品,也为解释浙金钱草长期作为浙江地区金钱草药材的代替习用品寻找到遗传学方面的理由.该研究为金钱草的分子鉴定提供了技术支持,有利于金钱草药材市场规范化,为浙金钱草后续的开发研究提供了一定的参考依据.
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