荧光双向电泳和串联质谱技术检测卵巢上皮癌血清标志物的研究

来源 :中华肿瘤杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lwgalj2005
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目的 通过差异蛋白质组学的方法寻找卵巢上皮癌血清标志物,以提高卵巢癌诊断的灵敏度和特异度.方法 收集103例卵巢上皮癌、60例正常对照、63例卵巢良性肿瘤和63例盆腔良性病变患者的血清.按照患者年龄匹配,选取卵巢上皮癌、盆腔良性病变、卵巢良性肿瘤和正常对照者血清各20例,等容积混合,去除高丰度白蛋白和IgC后,进行荧光双向电泳(2-DE DIGE),实验重复3次.以OyCyder软件分析得出有显著差异的蛋白质点,以基质辅助激光解吸离子飞行时间串联质谱(MALDI TOF/TOF)鉴定差异蛋白质,分别采用Western blot和酶联免疫吸附实验(ELISA)验证获选的血清标志物.结果 2-DE DIGE得出有显著差异的蛋白质点41个,MALDI TOF/TOF成功鉴定出其中的28个蛋白质.上调最显著的蛋白质为结合珠蛋白(Hp),下调最显著的蛋白质为转铁蛋白(Tf).Western blot和ELISA验证结果显示,Hp和Tf在卵巢上皮癌与正常对照、卵巢上皮癌与卵巢良性肿瘤、卵巢上皮癌与盆腔良性病变之间的差异有统计学意义(均P=0.000).CAl25+Hp+Tf联合检测诊断卵巢上皮癌的灵敏度(81.6%)和特异度(76.9%)高于CA125(78.6%和70.4%)、Hp(69.9%和70.4%)和Tf(66.0%和70.4%)单独检测.结论 Hp和Tf是卵巢上皮癌血清中差异表达的蛋白质,可作为卵巢上皮癌的血清标志物,CAl25+Hp+Tf联合检测有助于提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度.
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