mHCN4基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞重建起搏离子流通道

来源 :中国心脏起搏与心电生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zxcvxcv
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目的观察超极化激活的环核苷酸门控通道亚型4(mHCN4)外源基因对小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)的转染及其功能表达。方法2个月大昆明小鼠拉颈处死,无菌条件下分离股、胫骨,收集骨髓细胞种植于塑料培养瓶,24h后更换培养液,保留贴壁细胞,待细胞达90%融合时胰酶消化传代培养。收集第3代贴壁细胞,用免疫磁珠法分选CD11b-细胞继续扩增培养。以pUC18、pcDNA3-mHCN4、pIRES2-EGFP、pMSCV-puro等质粒载体为架构,用不同酶类将目的片段连接构建pMSCV-mHCN4-EGFP及pM
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