【摘 要】
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目的 基于斑马鱼模型，通过生化指标、病理组织学、体内细胞凋亡检测和分子生物学技术整合评价模式对吴茱萸提取物肝毒性进行综合评价。方法 给予亚致死剂量(＜LC10)下的吴茱萸提取物24 h，测定丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（aspartic aminotransaminase,AST）活性，观察斑马鱼肝脏病理组织，吖啶橙（aeridi
【机 构】
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北京中医药大学中药品质评价北京市重点实验室
【基金项目】
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国家科技重大专项（2018ZX09735005）； 北京中医药大学新教师启动基金项目（2020-JYB-XJSJJ-009）;北京中医药大学重点攻关项目（2020-JYB-ZDGG-035）；
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目的 基于斑马鱼模型，通过生化指标、病理组织学、体内细胞凋亡检测和分子生物学技术整合评价模式对吴茱萸提取物肝毒性进行综合评价。方法 给予亚致死剂量(＜LC10)下的吴茱萸提取物24 h，测定丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（aspartic aminotransaminase,AST）活性，观察斑马鱼肝脏病理组织，吖啶橙（aeridine orange,AO）染色观察肝脏细胞凋亡状态，结合蛋白质印迹法Western blotting、实时定量聚合酶链反应（realtime quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）和代谢组学初步探究吴茱萸毒性机制。结果 给予吴茱萸提取物后，斑马鱼AST、ALT活性均显著升高，肝脏病理组织苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）染色及AO染色观察提示斑马鱼肝脏受损，细胞凋亡增加，相关凋亡基因和蛋白表达水平显著上升，非靶向代谢组学结果表明吴茱萸提取物影响斑马鱼氨基酸代谢。结论 通过斑马鱼模型整合评价方法从多水平、多角度、多指标实现吴茱萸诱导肝毒性的综合评价，为斑马鱼在中药肝毒性评价的适用性提供了支撑。
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