【摘 要】
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在不同pHNaCl的磷酸缓冲体系 ,比较了牛血清蛋白 (BSA)、核糖核酸酶 (RNase)、细胞色素C(Cyt C)和溶菌酶 (Lys)在IDA裸柱和一些金属螯合柱上的保留特性 ,考察了固定金属对蛋
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在不同pHNaCl的磷酸缓冲体系 ,比较了牛血清蛋白 (BSA)、核糖核酸酶 (RNase)、细胞色素C(Cyt C)和溶菌酶 (Lys)在IDA裸柱和一些金属螯合柱上的保留特性 ,考察了固定金属对蛋白质保留行为的影响。指出蛋白质在强结合IDA Cu柱上的保留主要受固定金属和蛋白质间配位作用支配。在弱亲和的IDA Ni、IDA Co和IDA Zn柱上的保留主要受静电作用控制 ,配位作用为辅。讨论了金属螯合亲和色谱中影响蛋白质和金属配位的主要因素 :金属离子的电荷和半径、配位原子对中心离子外层d轨道的影响 ,以及蛋白质表面配位的组氨酸数目、离解常数和取向。影响金属螯合配体和蛋白质静电作用的主要因素为溶液的pH和蛋白质的等电点pI。
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