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目的建立人角膜上皮干细胞体外培养体系,并探讨体外培养的人角膜干细胞的鉴定方法,从其生物学特性方面,为角膜上皮干细胞移植奠定基础.方法采用低钙培养法对人角膜缘基底层细胞组织块进行培养.从生长特性、光镜特征、超微结构特点以及免疫细胞化学方面进行鉴别.结果培养细胞呈多边形典型上皮细胞形态生长.电镜下可见张力丝等典型上皮细胞结构.单克隆抗体4 G10.3染色,大部分阳性;AE 5染色,绝大多数为阴性.结论用无钙培养基与低钙培养基结合可获得较纯的、未分化的角膜干细胞.其鉴定应综合鉴别.