【摘 要】
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目的 探讨冷保存后体外培养的SD大鼠肝内不同节段胆管跨膜型黏蛋白Muc1、Muc3A、Muc4的表达情况.方法 用酶消化辅助机械分离方法获得SD大鼠肝内胆管组织,以非吻合口狭窄好发
【机 构】
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第三军医大学两南医院全军肝胆外科研究所、中国人民解放军西南肝胆外科医院
【基金项目】
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全军医学卫生科研基金科技攻关项目;
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目的 探讨冷保存后体外培养的SD大鼠肝内不同节段胆管跨膜型黏蛋白Muc1、Muc3A、Muc4的表达情况.方法 用酶消化辅助机械分离方法获得SD大鼠肝内胆管组织,以非吻合口狭窄好发部位为界分为大、小胆管.胆管片段在鼠尾胶原内培养48 h后进行实验.实验分为对照组、冷保存1 h组、冷保存12 h组.采用RT-PCR和Western blot法检测黏蛋白Muc1、Muc3A、Muc4的表达情况.3组比较采用方差分析,两两比较采用LSD法检验.结果 大、小胆管均表达黏蛋白Muc1、Muc3A、Muc4.随着冷保存时间延长,大胆管Muc1、Muc3A、Muc4 mRNA显著降低,冷保存1 h组分别为0.95±0.14、0.26±0.04、0.24±0.06,冷保存12 h组分别为0.18±0.03、0.14±0.04、0.22±0.07,对照组分别为1.00±0.20、1.00±0.09、1.00±0.21,3组比较差异有统计学意义(F=8.8,57.1,10.8,P＜0.05).冷保存12 h组Muc1和Muc3A mRNA显著低于冷保存1 h组(P＜0.05).大胆管Muc1、Muc4蛋白表达水平亦随冷保存时间延长而降低,对照组分别为1.05±0.41、1.06±0.38,冷保存1 h组分别为0.82±0.13、0.73±0.10,冷保存12 h组分别为0.56±0.11、0.33±0.04,3组比较差异有统计学意义(F=3.9,12.6,P＜0.05).冷保存12 h组Muc1蛋白显著低于对照组(P＜0.05).冷保存12 h组Muc4蛋白显著低于冷保存1 h组(P＜0.05).而小胆管Muc3A mRNA呈升高趋势,对照组为0.06±0.03,冷保存1 h组为0.15±0.04,冷保存12 h组为0.19±0.05,与大胆管不同.结论 长时间冷保存后肝内非吻合口狭窄好发部位胆管黏蛋白Muc1、Muc3A、Muc4表达显著降低,减弱了其对胆管上皮细胞的保护作用,可加重胆管损伤.
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