【摘 要】
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在完成小花棘豆毒素95%氨基酸序列的基础上,根椐已知的氨基酸序列,设计合成了特异简并引物.以小花棘豆总RNA为模板,逆转录合成cDNA第一链,用置换法合成双链cDNA.用特异引物对
【基金项目】
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中国科学院资助项目，国家科技攻关项目
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在完成小花棘豆毒素95%氨基酸序列的基础上,根椐已知的氨基酸序列,设计合成了特异简并引物.以小花棘豆总RNA为模板,逆转录合成cDNA第一链,用置换法合成双链cDNA.用特异引物对此双链cDNA进行PCR扩增,将扩增后的目的基因与用SmaⅠ酶切的质粒pUC 18连接,转化大肠杆菌JM107.筛选阳性克隆进行序列分析,获得了OXY基因的全部序列.经测序后测得基因序列与原氨基酸序列对照完全一致.GenBnak数据检索说明,OXY基因编码序列确定是一个从未报道的序列.此研究结果对该毒素的应用研究奠定了基础.
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