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摘要[目的]研究党参种子的检验方法及质量标准。[方法]从山西、甘肃和陕西3省6县共收集和调查27份党参种子，并参照《农作物种子检验规程》GB/T 3543.1-7，1995对其净度分析、千粒重、发芽率、生活力测定、含水率等指标的检验方法进行研究，制定党参种子最佳质量检验方法。并根据制定的检验方法和规程，对不同产区的27份党参种子样品进行质量检验，采用K类中心聚类法制定种子质量分级标准。[结果]党参种子喜凉不喜热，适合栽培在天气凉爽的地区，发芽的最适温度应是25 ℃，最适发芽床是纱布床；最适宜染色条件为染色温度40 ℃，TTC浓度0.5%，染色时间4 h；在聚类分析基础上，将净度、千粒重、含水率、活力、发芽率5项指标作为质量分级指标，将党参种子质量可分为3级标准，活力和发芽率差异明显，成为分级标准的最重要因素，其次是净度、千粒重和含水率。[结论]该研究为党参规范化栽培和产业化发展提供了重要依据。
关键词 党参（RADIX CODONOPSIS）；种子；检验规程；分级标准
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2014）14-04286-05
The Study of Seed Testing Method and Quality Standard on Codonopsis pilosula
XIAO Shuxian et al （Shanxi Zhendong Genuine Medicinal Materials Development Co. Ltd， Changzhi， Shanxi 047100）
Abstract[Objective] To study inspection method and quality standard of Codonopsis pilosula seeds. [Method] 27 Codonopsis pilosula seeds were collected and investigated in six counties of Shanxi， Gansu and Shaanxi Province. This article research the test methods of the moisture content， 1 000grain weight， germination rate， determination of life force according to the crop seed inspection procedures of GB/T 3543.1 7 1995 in order to formulate C. pilosula seeds best quality inspection methods. And according to the test methods and regulations， test quality of C. pilosula seeds of the 27 different regions was conducted. It is used to establish seed quality classification standard with K class center clustering method in order to provide important basis for C. pilosula standardization cultivation and industrialization development. [Result] The optimal germination temperature of C. pilosula seeds is 25 ℃， the optimal germination bed is etamine bed； the optimal dyeing condition is temperature 40℃， TTC concentration 0.5%， time 4 h； On the basis of clustering analysis， cleanliness， 1000 grain weight， moisture content， germination rate， vitality were used as quality classification index， the quality of C. pilosula seeds were divided into 3 level standard， germination rate and life force are the most important factors， purity， 1 000grain weight and moisture content rank the second place. [Conclusion] The study can provide important basis for C. pilosula standardization cultivation and industrialization development.
Key words Codonopsis pilosula； Seeds； Inspection procedures； The classification standard
黨参（RADIX CODONOPSIS）为常用中药，味甘性平，具有补中益气和健脾益肺之功能，用于治疗脾肺虚弱、气短心悸、虚喘咳嗽、食少便搪和内热消渴等症[1]，并常作为人参的替代品。中国药典（2010版一部）收载有党参[Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.]、川党参（Codonopsis tangshen Oliv.）和素花党参[Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta （Nannf.）L.T. Shen][1]。党参广泛分布于全国各地，并有大量栽培，是中药党参最主要的植物来源，主产区为山西、甘肃和四川等[2-3]。素花党参仅分布于四川、甘肃和陕西交界处，以栽培为主，绝大部分出口至东南亚一小部分内销[3]；川党参主要分布于重庆和湖北西部。市场上缺乏种子质量标准、种子质量参差不齐，而种子检验是保证种子质量的重要措施。笔者参照《农作物种子检验规程》GB/T3543.2-7，1995对党参种子的检验方法及至质量标准进行研究，以期为党参人工种植和野生资源保护提供理论依据。 1材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。供试材料为2012年11月份和2013年2月份在山西省、陕西省和甘肃省收集的党参种子共27份。种子收集后采用纸袋包装置阴凉干燥处备用，来源见表1。试验于2013年3月1日在山西振东道地药材开发有限公司实验室内进行。
1.2方法
1.2.1 党参种子净度试验。按照《农作物种子检验规程》GB/T 3543.3中的净度分析，先随机选取3个不同产地的党参种子9份，每个产地重复3次。种子净度分析试验所需试样量应至少包含2 500粒种子（1.000 g左右），将称重后的试样借助筛子、放大镜等在净度分析台上分离成干净种子和一般杂质两种成分后分别称重，以g表示，计算净种子质量百分率、杂质质量百分率。净度分析后的增失差（净度分离后的各成分之和与原始重量之差）不得超过5%，若超过允许误差，必须重新进行试验。按照此分析方法，对27份种子进行净度分析。
1.2.2 党参种子千粒重试验。随机选取3个产地的党参种子9份，每个产地重复3次。先采用百粒法、五百粒法、千粒法进行测定，即从已经测定净度的样品中随机数出100、500、1 000粒种子，进行称重，以g表示，即得百粒重、五百粒重、千粒重。种子的变异系数不超过4%，否则重新进行试验。
1.2.3 党参种子发芽试验。
1.2.3.1 发芽温度的筛选。设置15、20、25和30 ℃ 4种温度下处理，至恒温箱内光照培养，每个处理100粒种子，设3个重复[4]。发芽床采用规格一致的培养皿，112 ℃高压灭菌后，皿底平铺3层滤纸，沿培养皿边缘加蒸馏水，以倾斜培养皿无水渗出为度。每隔12 h浇水1次，每隔24 h观察记载发芽种子数，以胚根突破种皮1 mm作为种子发芽的标准，筛选出最适宜的发芽温度[5]。
1.2.3.2 发芽床的筛选方法。按照试验筛选的最适宜的温度，在滤纸床、纱布床、脱脂棉床、海绵床和砂床5个不同发芽床上对甘肃省定西市陇西县首阳镇的种子进行发芽试验[5]。每个处理100粒种子，设3次重复，至恒温箱内光照培养。培养过程中每隔12 h浇1次蒸馏水，每隔24 h记录发芽种子数，直至发芽结束。
纸床是在规格一致的培养皿中铺3层滤纸，并用蒸馏水湿润，按照均等的距离摆好种子；纱布床是在规格一致的培养皿中铺3层纱布，并有蒸馏水湿润，按照均等的距离摆好种子；脱脂棉床是在规格一致的培养皿中铺1 cm厚脱脂棉，并有蒸馏水湿润，按照均等的距离摆好种子；海绵床是在规格一致的培养皿中铺1 cm厚海绵，并有蒸馏水湿润，按照均等的距离摆好种子；砂床是在规格一致的培养皿中铺砂子，再加蒸馏水，砂子与水的比例是4∶1，按照均等的距离摆好种子。
2.3.3 党参种子发芽率测定。由表2可知，11号（山西省长治市平顺县杏城镇玉峡关村）发芽率最高，为93.67%，2号、10号、20号和27号党参种子不发芽。不同产地的党参种子平均发芽率为72.58%。由表3可知，山西地区的种子的平均发芽率远远高于甘肃省。山西省的种子最高发芽率为78.98%，最低是0，平均发芽率为78.97%，各地方种子的发芽率差异极显著（P<0.01）。而甘肃省的种子其最高发芽率也高达87.39%，最低仅有6.15%，平均发芽率为55.59%，各地种子的发芽率差异明显。基于山西省甘肃省两地在种植过程中均喷洒了壮根灵[11]，所以造成山西地区（10、20号）、甘肃地区（2号）、陕西地区（27号）种子发芽率低且参差不齐的原因可能是因为收集时参杂了陈种子，或者是品种和当地气候等原因造成。
2.4党参种子活力测定 由表7可知，40 ℃下的党参种子着色率明显高于35和30 ℃下的着色率。温度为40 ℃时，TTC浓度为0.5%时党参种子着色率高于0.1%和1.0%浓度下的着色率。所以，党参种子最适宜染色条件为：染色温度40 ℃，TTC浓度0.5%，染色时间4 h。
由表2可知，不同产生党参种子着色率不同，12号（山西省长治市平顺县羊老岩乡门楼岭村）着色率最高，为94.84%，2号（甘肃省定西市临洮县陈家嘴镇）着色率最低，为6.15%，平均着色率为69.20%。
2.5党参种子含水率试验 选取甘肃省定西市陇西市首阳镇的党参种子采用高温烘干法测定含水率。由表8可知，在130 ℃温度下测定的含水率高于105 ℃，而在130 ℃烘干所需要时间较短，故采用130 ℃烘干测定含水率。由表2可知，采用130 ℃恒重烘干法测定的不同产地的党参种子含水率存在显著差异。党参种子含水率平均值为6.21%，11号（山西省长治市平顺县杏城镇玉峡关村）含水率最高，为6.79%；13号（山西省晋城市陵川县六泉乡六泉村）含水率最低，为5.64%。
3结论与讨论
通过对甘肃省、山西省、陕西省27个地区的党参种子发芽最适条件研究，所得主要结论如下：党参种子喜凉不喜热，适合栽培在天气凉爽的地区，发芽的最适温度应是25 ℃；最适发芽床都是纱布床；山西党参种子平均发芽率比甘肃地区的党参种子发芽率高出23.38%，但是现在山西地区党参的种植量在逐年下降，所以为了提高党参产量，应该考虑发展山西的党参种植。最适宜染色条件为染色温度40 ℃，TTC浓度0.5%，染色时间4 h。
在聚类分析基础上，将净度、千粒重、含水率、活力、发芽率5项指标作为质量分级指标，将党参种子质量可分为3级标准，活力和发芽率差异明显，成为分级标准的最重要因素，其次是净度、千粒重、含水率。1级标准种子千粒重不小于0.31 g，发芽率不小于87%，活力不小于84%，净度不小于94 g，含水率小于6.12%；2级标准种子千粒重0.29～0.30 g，发芽率81%～86%，活力73%～83%，净度92～93 g，含水率6.13%～6.23%；3级标准种子千粒重0.26～0.28 g，发芽率50%～80%，活力60%～72%，净度88～91 g，含水率6.13%～6.23%。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中国药典.一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：264.
[2] 毕红艳.党参种质资源的评价研究[D].北京：中国医学科学院药用植物研究所，2007：1-55.
[3] 何先元，陳媛媛，许晋芳，等.素花党参多糖的超声提取和含量测定[J].农技服务，2009，26（11）：135.
[4] 孙年喜，彭锐，李隆云，等.川党参种子发芽检验规程的研究[J].中国中药杂志，2008，33（11）：1246-1248.
[5] 苏宁宁，张丽萍，王艳芳，等.党参种子发芽率调查研究[J].中国农学通报，2012，28（4）：294-298.
[6] 颜启传.种子检验原理和技术[M].杭州：浙江大学出版社，2001：102-103.
[7] 苏宁宁.党参种子检验方法及质量标准的研究制定[D].北京：北京协和医学院，2012.
[8] 李瑞.素花党参种子种苗质量标准研究[D].兰州：甘肃农业大学，2012.
[9] 李红莉，徐有朋，李隆云，等.青蒿种子品种检验及质量标准的研究[J].种子，2008，11（27）：1-4.
[10] 刘琰璐，张昭，戴灵超，等.黄檗种子质量检验规程及分级标准研究[J].中国中药杂志，2011，36（23）：3227-3231.
[11] 陈玉武，丁永辉，李成义，等.党参壮根灵对党参质晕影响的研究[J].药物分析杂志，2011，31（2）：254-257.
关键词 党参（RADIX CODONOPSIS）；种子；检验规程；分级标准
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2014）14-04286-05
The Study of Seed Testing Method and Quality Standard on Codonopsis pilosula
XIAO Shuxian et al （Shanxi Zhendong Genuine Medicinal Materials Development Co. Ltd， Changzhi， Shanxi 047100）
Abstract[Objective] To study inspection method and quality standard of Codonopsis pilosula seeds. [Method] 27 Codonopsis pilosula seeds were collected and investigated in six counties of Shanxi， Gansu and Shaanxi Province. This article research the test methods of the moisture content， 1 000grain weight， germination rate， determination of life force according to the crop seed inspection procedures of GB/T 3543.1 7 1995 in order to formulate C. pilosula seeds best quality inspection methods. And according to the test methods and regulations， test quality of C. pilosula seeds of the 27 different regions was conducted. It is used to establish seed quality classification standard with K class center clustering method in order to provide important basis for C. pilosula standardization cultivation and industrialization development. [Result] The optimal germination temperature of C. pilosula seeds is 25 ℃， the optimal germination bed is etamine bed； the optimal dyeing condition is temperature 40℃， TTC concentration 0.5%， time 4 h； On the basis of clustering analysis， cleanliness， 1000 grain weight， moisture content， germination rate， vitality were used as quality classification index， the quality of C. pilosula seeds were divided into 3 level standard， germination rate and life force are the most important factors， purity， 1 000grain weight and moisture content rank the second place. [Conclusion] The study can provide important basis for C. pilosula standardization cultivation and industrialization development.
Key words Codonopsis pilosula； Seeds； Inspection procedures； The classification standard
黨参（RADIX CODONOPSIS）为常用中药，味甘性平，具有补中益气和健脾益肺之功能，用于治疗脾肺虚弱、气短心悸、虚喘咳嗽、食少便搪和内热消渴等症[1]，并常作为人参的替代品。中国药典（2010版一部）收载有党参[Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.]、川党参（Codonopsis tangshen Oliv.）和素花党参[Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta （Nannf.）L.T. Shen][1]。党参广泛分布于全国各地，并有大量栽培，是中药党参最主要的植物来源，主产区为山西、甘肃和四川等[2-3]。素花党参仅分布于四川、甘肃和陕西交界处，以栽培为主，绝大部分出口至东南亚一小部分内销[3]；川党参主要分布于重庆和湖北西部。市场上缺乏种子质量标准、种子质量参差不齐，而种子检验是保证种子质量的重要措施。笔者参照《农作物种子检验规程》GB/T3543.2-7，1995对党参种子的检验方法及至质量标准进行研究，以期为党参人工种植和野生资源保护提供理论依据。 1材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。供试材料为2012年11月份和2013年2月份在山西省、陕西省和甘肃省收集的党参种子共27份。种子收集后采用纸袋包装置阴凉干燥处备用，来源见表1。试验于2013年3月1日在山西振东道地药材开发有限公司实验室内进行。
1.2方法
1.2.1 党参种子净度试验。按照《农作物种子检验规程》GB/T 3543.3中的净度分析，先随机选取3个不同产地的党参种子9份，每个产地重复3次。种子净度分析试验所需试样量应至少包含2 500粒种子（1.000 g左右），将称重后的试样借助筛子、放大镜等在净度分析台上分离成干净种子和一般杂质两种成分后分别称重，以g表示，计算净种子质量百分率、杂质质量百分率。净度分析后的增失差（净度分离后的各成分之和与原始重量之差）不得超过5%，若超过允许误差，必须重新进行试验。按照此分析方法，对27份种子进行净度分析。
1.2.2 党参种子千粒重试验。随机选取3个产地的党参种子9份，每个产地重复3次。先采用百粒法、五百粒法、千粒法进行测定，即从已经测定净度的样品中随机数出100、500、1 000粒种子，进行称重，以g表示，即得百粒重、五百粒重、千粒重。种子的变异系数不超过4%，否则重新进行试验。
1.2.3 党参种子发芽试验。
1.2.3.1 发芽温度的筛选。设置15、20、25和30 ℃ 4种温度下处理，至恒温箱内光照培养，每个处理100粒种子，设3个重复[4]。发芽床采用规格一致的培养皿，112 ℃高压灭菌后，皿底平铺3层滤纸，沿培养皿边缘加蒸馏水，以倾斜培养皿无水渗出为度。每隔12 h浇水1次，每隔24 h观察记载发芽种子数，以胚根突破种皮1 mm作为种子发芽的标准，筛选出最适宜的发芽温度[5]。
1.2.3.2 发芽床的筛选方法。按照试验筛选的最适宜的温度，在滤纸床、纱布床、脱脂棉床、海绵床和砂床5个不同发芽床上对甘肃省定西市陇西县首阳镇的种子进行发芽试验[5]。每个处理100粒种子，设3次重复，至恒温箱内光照培养。培养过程中每隔12 h浇1次蒸馏水，每隔24 h记录发芽种子数，直至发芽结束。
纸床是在规格一致的培养皿中铺3层滤纸，并用蒸馏水湿润，按照均等的距离摆好种子；纱布床是在规格一致的培养皿中铺3层纱布，并有蒸馏水湿润，按照均等的距离摆好种子；脱脂棉床是在规格一致的培养皿中铺1 cm厚脱脂棉，并有蒸馏水湿润，按照均等的距离摆好种子；海绵床是在规格一致的培养皿中铺1 cm厚海绵，并有蒸馏水湿润，按照均等的距离摆好种子；砂床是在规格一致的培养皿中铺砂子，再加蒸馏水，砂子与水的比例是4∶1，按照均等的距离摆好种子。
2.3.3 党参种子发芽率测定。由表2可知，11号（山西省长治市平顺县杏城镇玉峡关村）发芽率最高，为93.67%，2号、10号、20号和27号党参种子不发芽。不同产地的党参种子平均发芽率为72.58%。由表3可知，山西地区的种子的平均发芽率远远高于甘肃省。山西省的种子最高发芽率为78.98%，最低是0，平均发芽率为78.97%，各地方种子的发芽率差异极显著（P<0.01）。而甘肃省的种子其最高发芽率也高达87.39%，最低仅有6.15%，平均发芽率为55.59%，各地种子的发芽率差异明显。基于山西省甘肃省两地在种植过程中均喷洒了壮根灵[11]，所以造成山西地区（10、20号）、甘肃地区（2号）、陕西地区（27号）种子发芽率低且参差不齐的原因可能是因为收集时参杂了陈种子，或者是品种和当地气候等原因造成。
2.4党参种子活力测定 由表7可知，40 ℃下的党参种子着色率明显高于35和30 ℃下的着色率。温度为40 ℃时，TTC浓度为0.5%时党参种子着色率高于0.1%和1.0%浓度下的着色率。所以，党参种子最适宜染色条件为：染色温度40 ℃，TTC浓度0.5%，染色时间4 h。
由表2可知，不同产生党参种子着色率不同，12号（山西省长治市平顺县羊老岩乡门楼岭村）着色率最高，为94.84%，2号（甘肃省定西市临洮县陈家嘴镇）着色率最低，为6.15%，平均着色率为69.20%。
2.5党参种子含水率试验 选取甘肃省定西市陇西市首阳镇的党参种子采用高温烘干法测定含水率。由表8可知，在130 ℃温度下测定的含水率高于105 ℃，而在130 ℃烘干所需要时间较短，故采用130 ℃烘干测定含水率。由表2可知，采用130 ℃恒重烘干法测定的不同产地的党参种子含水率存在显著差异。党参种子含水率平均值为6.21%，11号（山西省长治市平顺县杏城镇玉峡关村）含水率最高，为6.79%；13号（山西省晋城市陵川县六泉乡六泉村）含水率最低，为5.64%。
3结论与讨论
通过对甘肃省、山西省、陕西省27个地区的党参种子发芽最适条件研究，所得主要结论如下：党参种子喜凉不喜热，适合栽培在天气凉爽的地区，发芽的最适温度应是25 ℃；最适发芽床都是纱布床；山西党参种子平均发芽率比甘肃地区的党参种子发芽率高出23.38%，但是现在山西地区党参的种植量在逐年下降，所以为了提高党参产量，应该考虑发展山西的党参种植。最适宜染色条件为染色温度40 ℃，TTC浓度0.5%，染色时间4 h。
在聚类分析基础上，将净度、千粒重、含水率、活力、发芽率5项指标作为质量分级指标，将党参种子质量可分为3级标准，活力和发芽率差异明显，成为分级标准的最重要因素，其次是净度、千粒重、含水率。1级标准种子千粒重不小于0.31 g，发芽率不小于87%，活力不小于84%，净度不小于94 g，含水率小于6.12%；2级标准种子千粒重0.29～0.30 g，发芽率81%～86%，活力73%～83%，净度92～93 g，含水率6.13%～6.23%；3级标准种子千粒重0.26～0.28 g，发芽率50%～80%，活力60%～72%，净度88～91 g，含水率6.13%～6.23%。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中国药典.一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：264.
[2] 毕红艳.党参种质资源的评价研究[D].北京：中国医学科学院药用植物研究所，2007：1-55.
[3] 何先元，陳媛媛，许晋芳，等.素花党参多糖的超声提取和含量测定[J].农技服务，2009，26（11）：135.
[4] 孙年喜，彭锐，李隆云，等.川党参种子发芽检验规程的研究[J].中国中药杂志，2008，33（11）：1246-1248.
[5] 苏宁宁，张丽萍，王艳芳，等.党参种子发芽率调查研究[J].中国农学通报，2012，28（4）：294-298.
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[8] 李瑞.素花党参种子种苗质量标准研究[D].兰州：甘肃农业大学，2012.
[9] 李红莉，徐有朋，李隆云，等.青蒿种子品种检验及质量标准的研究[J].种子，2008，11（27）：1-4.
[10] 刘琰璐，张昭，戴灵超，等.黄檗种子质量检验规程及分级标准研究[J].中国中药杂志，2011，36（23）：3227-3231.
[11] 陈玉武，丁永辉，李成义，等.党参壮根灵对党参质晕影响的研究[J].药物分析杂志，2011，31（2）：254-257.