不同方式构建宫腔粘连大鼠模型的比较

来源 :昆明医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asa333
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目的 通过采取不同的处理方式构建宫腔粘连大鼠模型,以筛选出更稳定的宫腔粘连大鼠模型,为进一步研究宫腔粘连的发生机制以及为新的治疗方式提供理论依据。方法 将48只雌性发情期的SD大鼠随机分为4组,即对照组、脂多糖棉线组(带线组)、脂多糖注射组(注射组)、脂多糖明胶组(明胶组),每组12只。分别于建模7 d、14 d、28 d每组各处死4只大鼠并取子宫内膜组织检测,使用HE染色观察大鼠子宫内膜腺体数量变化情况,使用Masson染色观察大鼠子宫内膜纤维化面积变化情况,使用免疫组织化法检测纤维化蛋白TGF-β1的表达情况。使用Western Blot检测纤维化蛋白Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1的蛋白表达情况。结果 (1)HE染色结果显示,建模7 d、14 d、28 d,各组腺体数量均较对照组减少(P <0.05)。其中建模14 d、28 d,注射组的腺体数量比带线组及明胶组均减少更明显(P <0.05),且建模28 d时,注射组腺体数量几乎为0。(2)Masson染色结果显示,带线组、注射组、明胶组在建模7 d、14 d、28 d大鼠的子宫内膜纤维化程度均明显较对照组高(P <0.05),经过不同组之间的比较发现,注射组大鼠的子宫内膜纤维化程度较带线组、明胶组高(P <0.05),且造模28d注射组最严重。(3)免疫组化染色结果显示,在建模7 d、14 d、28 d时,带线组、注射组、明胶组等各组大鼠TGF-β1的表达均较对照组显著增加,除造模7 d的带线组、明胶组外,其余各组结果之间均具有统计学意义(P <0.05)。建模7 d、28 d时,注射组TGF-β1的表达量较明胶组升高(P <0.05)。(4)Western blot结果表明,机械损伤后不同的感染细菌脂多糖处理方式都会上调纤维化相关蛋白的表达,经过不同组之间的比较发现,造模7 d、14 d、28 d,注射组较明胶组Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ、α-SMA及TGF-β1表达升高(P <0.05),但明胶组与带线组相比,组间结果无统计学意义(P> 0.05);造模7 d,注射组较带线组Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ、α-SMA蛋白表达升高(P <0.05),造模14 d,注射组较带线组Collagen-Ⅲ、α-SMA蛋白表达升高(P <0.05),造模28 d,注射组较带线组Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ、α-SMA及TGF-β1蛋白表达升高(P <0.05)。且对照组相、带线组、注射组和明胶组4组中,注射组中的Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ、α-SMA及TGF-β1蛋白的表达都是最高的,经过机械损伤后,注射脂多糖损伤大鼠子宫的效果最为显著。结论 采用刮宫后宫腔内注射脂多糖的方式所获得的大鼠宫腔粘连模型较宫腔内放置脂多糖棉线或脂多糖明胶的损伤更严重,建模效果更好,且建模28 d时的大鼠宫腔粘连模型损伤最严重。刮宫后宫腔内放置脂多糖明胶作为一种新的方法,也能造成宫腔粘连。
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