【摘 要】
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目的对沙眼衣原体热休克蛋白60(Chsp60)进行表达和纯化,以获得高纯度的蛋白抗原.方法应用PCR扩增技术分离Chsp60的基因全长,采用基因工程的方法,应用融合表达载体重组、克隆
【机 构】
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110001,沈阳,中国医科大学附属第一临床学院P3实验室
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目的对沙眼衣原体热休克蛋白60(Chsp60)进行表达和纯化,以获得高纯度的蛋白抗原.方法应用PCR扩增技术分离Chsp60的基因全长,采用基因工程的方法,应用融合表达载体重组、克隆得到Chsp60特异抗原基因的重组菌株,经诱导表达获得重组融合蛋白,并经亲和层析获得纯品.结果得到了热休克蛋白60重组克隆菌株,成功地诱导表达并纯化了相对分子质量为87000的融合蛋白,纯度达90%以上,产量为2.5mg/L.结论获得的相对分子质量为60000的特异性抗原可用于检测衣原体感染患者血清中的抗体,有助于探讨Chsp60在免疫发病中的作用.
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