变形链球菌乳酸脱氢酶基因及同源区的克隆和序列分析

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目的:克隆变形链球菌乳酸脱氢酶基因(ldh)及其两侧同源区基因片段.方法:应用PCR技术扩增乳酸脱氢酶及其两端同源区序列片段,插入克隆载体pMD18-T中,转化大肠杆菌DH5α,Amp+抗性挑选阳性克隆,经酶切及PCR鉴定后进行序列测定.结果:PCR扩增产物特异;抗性筛选的4株菌落均为阳性克隆;用DNASIS将序列测定的结果与基因Bank中报道的序列对比分析,同源性为99.1%.结论:根据同源性分析的结果,可确定该克隆片段为变形链球菌乳酸脱氢酶及其两侧同源区序列.
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