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探讨长链非编码RNA HOXA末端转录本反义RNA(HOTTIP)在膀胱癌细胞中的表达,及其对膀胱癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其作用机制。
方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HOTTIP在癌旁组织和膀胱肿瘤组织、正常上皮细胞和膀胱癌细胞间的表达差异;细胞计数试剂盒(CCK-8)观察膀胱癌细胞的增殖情况;流式细胞术检测膀胱癌细胞的细胞周期进程;运用Transwell和划痕愈合实验观察细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂(TIMPs)蛋白表达水平。
结果HOTTIP在膀胱肿瘤组织中的表达(1.943±0.251)明显高于癌旁组织中的表达(1.002±0.091),差异有统计学意义(P<0.05);人源正常上皮细胞(SV-HUC-1)中HOTTIP的表达明显低于5637和T24中的表达(1.003±0.092比2.241±0.306和1.692±0.203),差异有统计学意义(P<0.05)。HOTTIP干扰组(si-HOTTIP)和阴性转染组(si-NC)干预5637和T24细胞48 h后,5637(0.881±0.182比1.824±0.193)和T24(0.623±0.094比1.332±0.153)细胞增殖能力显著降低(P<0.05),细胞周期均被阻滞在G0~G1期,细胞的迁移距离及穿膜率均降低,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均降低,TIMP1和TIMP2蛋白表达水平增加。
结论长链非编码RNA HOTTIP在膀胱肿瘤组织和细胞中下调,通过降低MMPs和升高TIMPs促进膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭。