Mtb-Ag活化γδT细胞的扩增及对γδT细胞CD69分子表达的影响

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目的 用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)激活和扩增γδT细胞,观察γδT细胞表面CD69分子表达的情况.方法 分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),用Mtb-Ag刺激PBMC,所得细胞用磁珠阳性分选,通过荧光单抗TCR γδPE染色及流式细胞仪检测γδT细胞所占比例.用γδPE/CD69FITC细胞双染检测初次刺激和再次刺激γδT细胞CD69分子的表达情况.结果 新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为(4.9±1.85)%,Mtb-Ag刺激培养10d后升为(69.2±6.57)%,免疫磁珠阳性分选后达(99.3±8.92)%.Mtb-Ag初次刺激γδT细胞,CD69分子的表达24 h达高峰,为75.2%;Mtb-Ag再次刺激γδT细胞,CD69分子的表达6h达高峰,为72%.结论 Mtb-Ag能特异地刺激PBMC中的γδT细胞增殖,Mtb-Ag初次和再次刺激均可特异性活化γδT细胞.
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