【摘 要】
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目的 研究高三尖杉酯碱 (HHT)诱导白血病细胞凋亡与细胞端粒酶和端粒酶逆转录酶 (hTERT)水平的关系。方法 在体外 ,以HL60细胞株细胞为对象 ,采用半定量RT PCR法检测hTERTm
【机 构】
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浙江大学医学院附属第一医院,浙江大学医学院附属第一医院 310003,310003,现在郑州大学第一附属医院血液科
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目的 研究高三尖杉酯碱 (HHT)诱导白血病细胞凋亡与细胞端粒酶和端粒酶逆转录酶 (hTERT)水平的关系。方法 在体外 ,以HL60细胞株细胞为对象 ,采用半定量RT PCR法检测hTERTmRNA表达量 ;采用端粒重复序列扩增法 (TRAP) 酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测端粒酶活性 ;采用TUNEL法检测凋亡细胞。结果 与空白对照相比 ,HHT能够下调hTERTmRNA的表达。HHT浓度为 0 .0 0 5~ 0 .0 3 0 μg/ml时 ,HL60细胞hTERTmRNA表达无明显变化 ;当浓度增至 0 .0 40~ 0 .0 5 0 μg/ml,hTERTmRNA表达量下降至检测不出。0 .0 2 0 μg/mlHHT作用 18h后 ,hTERTmRNA表达呈下降趋势 ,2 4h后端粒酶活性明显下降 ,两者的下降趋势基本相似 ,但hTERTmRNA表达下降幅度较端粒酶活性下降幅度更大。在HHT作用下 ,HL60细胞凋亡率增加 ,而端粒酶活性及hTERTmRNA水平下降 ,且与HHT浓度或作用时间相关。结论 HHT下调端粒酶活性可能与hTERTmRNA转录水平下降有关。通过下降hTERTmRNA转录和端粒酶活性可能是HHT诱导HL60细胞凋亡的原因之一
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