【摘 要】
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目的 为研究p53家族调控细胞凋亡的机制,构建并鉴定插入人Puma基因的启动子片段的荧光素酶报告基因载体.方法 采用PCR技术从人类HepG2细胞中扩增Puma启动子的含p53反应元件的
【机 构】
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第三军医大学西南医院西南癌症中心,Japan
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目的 为研究p53家族调控细胞凋亡的机制,构建并鉴定插入人Puma基因的启动子片段的荧光素酶报告基因载体.方法 采用PCR技术从人类HepG2细胞中扩增Puma启动子的含p53反应元件的180 bp DNA片段,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中.经测序确定所扩增的DNA序列;将其转染入人类肺腺癌H1299细胞中,双报告基因实验检测荧光素酶活力.结果 测序结果表明扩增的Puma启动子序列正确,活性检测显示构建的报告基因具有启动子活性.结论 克隆了含p53反应元件的Puma启动子,成功构建了人类Puma启动子报告基因,为p53家族凋亡通路的功能研究提供了必要的实验材料.
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