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[目的]获得真核表达的Flag—PKR融合蛋白,以用于流感病毒相关的PKR信号通路调控机制研究。[方法]以RT—PCR方法扩增PKR目的基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0-Flag中。将所构建的重组质粒pcDNA3.0-Flag—PKR转染293T细胞,利用Flag抗体偶联的琼脂糖凝胶(anti—FlagM2-Agarose)纯化Flag-PKR融合蛋白,所得产物进行SDS—PAGE、Westernblot及体外活性鉴定。[结果]重组质粒转染293T细胞,Westem blot显示表达出的融合蛋