大鼠出生早期LPS暴露远隔抑制成年期EAE发病与巨噬细胞免疫功能抑制有关

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目的

探讨大鼠出生早期经脂多糖(LPS)暴露远隔抑制成年期实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病的机制是否与外周单核细胞来源巨噬细胞免疫功能抑制有关。

方法

同窝雄性新生SD大鼠按随机数字表法分为3组:空白对照组(n=11)、磷酸盐缓冲液(PBS)组(n=12)、LPS组(n=12),其中LPS组于出生后第3、5天腹腔注射50μL含非致死剂量LPS的PBS溶液,空白对照组及PBS组同期注射50μL无菌PBS溶液;PBS组、LPS组于12周龄用豚鼠脊髓匀浆与完全弗氏佐剂混合乳液免疫诱导制作EAE模型,空白对照组仅用完全弗氏佐剂乳液进行免疫诱导。从免疫诱导当天开始持续观察记录各组大鼠行为学评分,并在发病高峰期处死大鼠,采用HE染色观察脊髓组织病理学改变,采用流式细胞术检测外周单核细胞来源巨噬细胞中枢浸润数量及其CD86、CD80、主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ表达水平,采用荧光定量PCR检测巨噬细胞CC型趋化因子受体2(CCR2)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA表达。

结果

与PBS组比较,LPS组EAE发病率下降(11/12 vs. 5/12),发病潜伏期延长[(10.50±0.71) d vs. (12.17±1.17) d],累积行为学评分与最高行为学评分下降(20.00±9.13 vs. 5.58±7.12;2.58±1.08 vs. 1.03±0.83),HE染色切片评分降低(2.83±0.75 vs. 1.17±1.17),巨噬细胞中枢浸润数量减少[(202.70±81.89)×103vs. (92.58±42.65)×103个],巨噬细胞CD80、MHC-Ⅱ表达水平降低,巨噬细胞CCR2IL-1βTNF-α mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P< 0.05)。

结论

大鼠出生早期LPS暴露可远隔抑制成年期EAE发病,其内在机制可能与巨噬细胞免疫功能抑制有关。

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