【摘 要】
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为了建立检测(番鸭)呼肠孤病毒(DRV)感染的方法,本研究根据DRV的σNS基因核苷酸序列设计引物及TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了该病毒的TaqMan探针实时荧光RT-PCR检测方法
【机 构】
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福建农林大学动物科学学院,福建省动物疫病预防与控制中心
【基金项目】
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福建省自然科学基金重大项目(2002F003)致谢:衷心感谢深圳市匹基生物工程股份有限公司杨伟经理在实验过程中给予的帮助.
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为了建立检测(番鸭)呼肠孤病毒(DRV)感染的方法,本研究根据DRV的σNS基因核苷酸序列设计引物及TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了该病毒的TaqMan探针实时荧光RT-PCR检测方法。用已知浓度的重组质粒为标准品,构建的标准曲线的相关系数达到99%。试验表明,该方法的重复性、稳定性、特异性良好,且灵敏度高,可以检测到1.0×10^2拷贝/μL的标准品,比普通PCR至少高100倍。该检测方法对DRV人工感染番鸭肝脏组织检出率达到100%。本实验所建立的TaqMan探针荧光RT-PCR
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