重组转化生长因子β3基因对大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原表达的影响

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:syh904
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目的 观察转化生长因子β3基因(TGF β3)对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6) Ⅰ型胶原合成的影响.方法 TGF β3表达质粒[pcDNA3.1(+)-TGF β3]和TGF β1表达质粒[pcDNA3.1(+)-TGF β1]的构建.通过脂质体介导方法,将pcDNA3.1(+)-TGF β1、pcDNA3.1(+)-TGF β3分别及共同转染体外培养的HSC-T6细胞,荧光定量PCR法及Western blot法分别检测转染后TGF β1、TGF β3、Ⅰ型胶原mRNA及蛋白质的表达.将pcDNA3.1(+)-TGF β1转染HSC-T6细胞,经G418筛选建立高表达TGF β1的HSC-T6细胞克隆,pcDNA3.1(+)-TGF β3转染克隆细胞,荧光定量PCR法检测转染后TGF β3、TGF β1及Ⅰ型胶原mRNA的表达,Western blot法检测TGF β1、Ⅰ型胶原蛋白的表达情况.结果 构建的pcDNA3.1(+)-TGF β3、pcDNA3.1(+) TGF β1质粒可转染HSC-T6细胞,转染率28.2%.pcDNA3.1(+)-TGF β3转染细胞后, I型胶原mRNA及蛋白的表达较空白组及对照组增加,以72 h增高最为明显(P《0.05),共转染组I型胶原mRNA及蛋白质的表达较pcDNA3.1(+)-TGF β1转染组明显降低(P《0.05).TGF β3转染克隆细胞后,TGF β1 mRNA表达较克隆组无明显改变(P》0.05),而蛋白质表达明显下降(P《0.05),I型胶原mRNA及蛋白质表达均较克隆组明显降低(P《0.05).结论 TGF β3基因转染正常培养的HSC-T6细胞,增加I型胶原的表达,转染高表达TGF β1的克隆组HSC-T6细胞, I型胶原表达明显降低,提示TGF β3对肝纤维化的发生有抑制作用.
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