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摘 要：菊花有很好的药用和食用价值，在杭州也算特产，桐乡的种植面积较大。本文以杭州万向学院花圃采摘的九种菊花品种为实验材料，研究九种菊花的总黄酮含量，比较每个菊花品种的质量差异，为制定菊花的相关质量标准提供相应的理论参考，为选育菊花的优良品种提供科学依据。
关键词：不同品种菊花；总黄酮；含量比较
菊花，Dendranthema morifolium（Ramat. ）Tzvel. 为菊科菊属多年生的宿根草本植物，是中国的传统花卉，有极高的观赏价值，也具有很高的药用价值。临床上多用于治疗风热感冒、头晕目眩、眼目昏花、目赤肿痛等疾病。除此之外菊花还具有抑菌消炎、调节免疫系统、抗疲劳等作用，近年来的新发现菊花对肝的保护作用、镇痛作用。黄酮成分具有抗衰老和抗菌抗病毒作用。
1.药用菊花的化学成分
菊花中的有效成分主要包括三类：黄酮类、挥发油、多糖等。随着近几年检测方法以及提取工艺的提高，对于菊花的黄酮类成分研究越来越深入。从菊花中已经分离得到的黄酮类成分有香叶木素、香叶木素 7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素、金合欢素7-O-β-D-葡萄糖苷、金合欢素 7-O-（6″-O-乙酰）-β-D-葡萄糖苷、金合欢素、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素和异泽兰黄素。
2.菊花的总黄酮测定方法构建
2.1建立菊花的种质资源圃
菊花是药材，广泛应用于医药和生活等方面，本次研究的菊花样品是我院花圃种质资源圃中选取9个不同菊花花序的品种，进行总黄酮的测定，相对来说贮藏时间较短，成分较为完整。先是菊花杀青1分钟，然后放入烘箱干燥再粉碎，然后装袋标记。
2.2 菊花总黄酮的测定方法
不同栽培类型的品种中的菊花总黄酮含量存在明显的差异，因此采用高效的提取工艺是非常重要的。通常采用回流提取法、超声提取法和60℃水温恒温萃取法。除了这些提取方法还有一些别的提取方法，如索氏提取法、超临界流体提取法等等，而方法的选择是根据测定的化学成分而定的。测定总黄酮的最佳方法就是超声提取法。相比普通的回流提取更加节能、省时、高效等优点。
2.3 仪器与试药及菊花品种
紫外-可见分光光度计；精确到0.0001g的电子天平；芦丁对照品。1%氢氧化钠溶液，10%硝酸铝溶液， 5%亚硝酸钠溶液，70%乙醇溶液。所用的水均为蒸馏水，试剂均为分析纯。采集品种有锦菊1号（区试）、早小洋菊（区试）、金菊3号（区试）、金丝黄菊、婺源黄菊、大洋菊、金菊1号、小黄菊、早小洋菊。
2.4 定制标准曲线
首先要将芦丁对照品配成溶液浓度为0.1992mg/ml。精密称取芦丁对照品0.0996g，用无水甲醇溶解，转移入50ml容量瓶中，用无水甲醇定容至50ml刻度线，摇匀。精确移取5.0ml到50ml容量瓶中，用无水甲醇定容到50ml，摇匀。准确吸取该芦丁对照品溶液0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5ml分别移入10ml的容量瓶中，加甲醇至3.5ml，先加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml，摇匀，放置6分钟后再加入10%硝酸铝溶液0.5ml摇匀，放置6分钟，最后加入1%氢氧化钠溶液5ml，摇匀，用水定容至10ml刻度线，放置12分钟后，以空白溶液（不加芦丁对照品，直接用无水甲醇）为参比，在波长510nm出测吸光度，得到方程式：Y=10.129C-0.0065（r=0.9992）。线性范围：0.212～0.742mg/ml。
2.5样品液的制备
实验所需的试液都要提前准备。取药材0.2500±0.0010g，精确称定重量，放入具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，密塞，称定重量，并记录，超声处理40分钟，放置冷却，再称定重量，用70%乙醇补足损失的重量，再摇匀，过滤，取续滤液1ml，用70%乙醇定容于10ml容量瓶至刻度线，从中取3.5ml，移入10ml的容量瓶种，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml，摇匀，放置6分钟后分别加10%硝酸铝溶液0.5ml摇匀，放置6分钟，再分别加1%氢氧化钠溶液5ml，摇匀，用水定容至10ml刻度线，放置12分钟后，以空白溶液（不加菊花超声过滤的续滤液，用70%乙醇代替）为参比，在波长510nm出测吸光度。并记录数据。
2.6重复性实验
精密称取同一样品2份，按含量测定方法，重复测定总黄酮的含量，结果RSD小于5%，实验重复性良好。
3.数据分析
每一种样品是称取2份做重复性实验，测定数据分别为重复1、重复2。结合重复1、重复2的数据RSD小于5%则为合格，并记录，若数据RSD大于5%则为不合格，样品需要重复实验，表格中的数据均为重复性实验合格。测定结果见表。
%，去掉最高值最低值，中间水平大约在7.2281%之间。其中每个品种都做了2份重复性实验，达到重复性合格才放到表格之中。
4.总结
所有样品的总黄酮含量在5.3899 %～9.6367%之间，以婺源黄菊最高，小黄菊最低，锦菊1号（区试）、早小洋菊（区试）、婺源黄菊、金菊1号、早小洋菊在7%以上，通过本研究，得出婺源黄菊的总黄酮含量上较有优势，为选育高总黄酮菊花的优良品种提供科学依据。
参考文献：
[1]陈志莲，不同贮藏期，不同品种菊花中总黄酮的含量比较[J].基層中药杂志，2001，15（05）：18-19.
[2]杨铭，吴志谊，吴川，马宝娟. 可见光及紫外光分光光度法测定菊花总黄酮含量的研究[J].广东化工，2007，34（04）：112-114.
[3]贾凌云，孙毅，王春阳，孙启时. 菊花总黄酮提取工艺研究[J] .中药材，2003，26（01）：35-37.
作者简介：
刘茂泉（1968、2--），男，汉族，浙江杭州人，讲师，硕士，主要从事园艺植物生产技术研究。
关键词：不同品种菊花；总黄酮；含量比较
菊花，Dendranthema morifolium（Ramat. ）Tzvel. 为菊科菊属多年生的宿根草本植物，是中国的传统花卉，有极高的观赏价值，也具有很高的药用价值。临床上多用于治疗风热感冒、头晕目眩、眼目昏花、目赤肿痛等疾病。除此之外菊花还具有抑菌消炎、调节免疫系统、抗疲劳等作用，近年来的新发现菊花对肝的保护作用、镇痛作用。黄酮成分具有抗衰老和抗菌抗病毒作用。
1.药用菊花的化学成分
菊花中的有效成分主要包括三类：黄酮类、挥发油、多糖等。随着近几年检测方法以及提取工艺的提高，对于菊花的黄酮类成分研究越来越深入。从菊花中已经分离得到的黄酮类成分有香叶木素、香叶木素 7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素、金合欢素7-O-β-D-葡萄糖苷、金合欢素 7-O-（6″-O-乙酰）-β-D-葡萄糖苷、金合欢素、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素和异泽兰黄素。
2.菊花的总黄酮测定方法构建
2.1建立菊花的种质资源圃
菊花是药材，广泛应用于医药和生活等方面，本次研究的菊花样品是我院花圃种质资源圃中选取9个不同菊花花序的品种，进行总黄酮的测定，相对来说贮藏时间较短，成分较为完整。先是菊花杀青1分钟，然后放入烘箱干燥再粉碎，然后装袋标记。
2.2 菊花总黄酮的测定方法
不同栽培类型的品种中的菊花总黄酮含量存在明显的差异，因此采用高效的提取工艺是非常重要的。通常采用回流提取法、超声提取法和60℃水温恒温萃取法。除了这些提取方法还有一些别的提取方法，如索氏提取法、超临界流体提取法等等，而方法的选择是根据测定的化学成分而定的。测定总黄酮的最佳方法就是超声提取法。相比普通的回流提取更加节能、省时、高效等优点。
2.3 仪器与试药及菊花品种
紫外-可见分光光度计；精确到0.0001g的电子天平；芦丁对照品。1%氢氧化钠溶液，10%硝酸铝溶液， 5%亚硝酸钠溶液，70%乙醇溶液。所用的水均为蒸馏水，试剂均为分析纯。采集品种有锦菊1号（区试）、早小洋菊（区试）、金菊3号（区试）、金丝黄菊、婺源黄菊、大洋菊、金菊1号、小黄菊、早小洋菊。
2.4 定制标准曲线
首先要将芦丁对照品配成溶液浓度为0.1992mg/ml。精密称取芦丁对照品0.0996g，用无水甲醇溶解，转移入50ml容量瓶中，用无水甲醇定容至50ml刻度线，摇匀。精确移取5.0ml到50ml容量瓶中，用无水甲醇定容到50ml，摇匀。准确吸取该芦丁对照品溶液0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5ml分别移入10ml的容量瓶中，加甲醇至3.5ml，先加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml，摇匀，放置6分钟后再加入10%硝酸铝溶液0.5ml摇匀，放置6分钟，最后加入1%氢氧化钠溶液5ml，摇匀，用水定容至10ml刻度线，放置12分钟后，以空白溶液（不加芦丁对照品，直接用无水甲醇）为参比，在波长510nm出测吸光度，得到方程式：Y=10.129C-0.0065（r=0.9992）。线性范围：0.212～0.742mg/ml。
2.5样品液的制备
实验所需的试液都要提前准备。取药材0.2500±0.0010g，精确称定重量，放入具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，密塞，称定重量，并记录，超声处理40分钟，放置冷却，再称定重量，用70%乙醇补足损失的重量，再摇匀，过滤，取续滤液1ml，用70%乙醇定容于10ml容量瓶至刻度线，从中取3.5ml，移入10ml的容量瓶种，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml，摇匀，放置6分钟后分别加10%硝酸铝溶液0.5ml摇匀，放置6分钟，再分别加1%氢氧化钠溶液5ml，摇匀，用水定容至10ml刻度线，放置12分钟后，以空白溶液（不加菊花超声过滤的续滤液，用70%乙醇代替）为参比，在波长510nm出测吸光度。并记录数据。
2.6重复性实验
精密称取同一样品2份，按含量测定方法，重复测定总黄酮的含量，结果RSD小于5%，实验重复性良好。
3.数据分析
每一种样品是称取2份做重复性实验，测定数据分别为重复1、重复2。结合重复1、重复2的数据RSD小于5%则为合格，并记录，若数据RSD大于5%则为不合格，样品需要重复实验，表格中的数据均为重复性实验合格。测定结果见表。
%，去掉最高值最低值，中间水平大约在7.2281%之间。其中每个品种都做了2份重复性实验，达到重复性合格才放到表格之中。
4.总结
所有样品的总黄酮含量在5.3899 %～9.6367%之间，以婺源黄菊最高，小黄菊最低，锦菊1号（区试）、早小洋菊（区试）、婺源黄菊、金菊1号、早小洋菊在7%以上，通过本研究，得出婺源黄菊的总黄酮含量上较有优势，为选育高总黄酮菊花的优良品种提供科学依据。
参考文献：
[1]陈志莲，不同贮藏期，不同品种菊花中总黄酮的含量比较[J].基層中药杂志，2001，15（05）：18-19.
[2]杨铭，吴志谊，吴川，马宝娟. 可见光及紫外光分光光度法测定菊花总黄酮含量的研究[J].广东化工，2007，34（04）：112-114.
[3]贾凌云，孙毅，王春阳，孙启时. 菊花总黄酮提取工艺研究[J] .中药材，2003，26（01）：35-37.
作者简介：
刘茂泉（1968、2--），男，汉族，浙江杭州人，讲师，硕士，主要从事园艺植物生产技术研究。