【摘 要】
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目的 检测p2 7在卵巢癌多细胞球体中的表达 ,探讨p2 7反义寡核苷酸 (p2 7 ASON)对卵巢癌多细胞球体紫杉醇耐药的逆转作用。方法 以三维培养方法获得的人卵巢癌A2 780、CAOV
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,华中科技大学同济医学院附属同济医院外科,中科技大学同济医学院附属同济医院外
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目的 检测p2 7在卵巢癌多细胞球体中的表达 ,探讨p2 7反义寡核苷酸 (p2 7 ASON)对卵巢癌多细胞球体紫杉醇耐药的逆转作用。方法 以三维培养方法获得的人卵巢癌A2 780、CAOV3多细胞球体 (MCS)为模型 ,以单层细胞为对照 ,采用流式细胞仪 (FACS)检测细胞周期变化 ,用蛋白质免疫印迹法 (Westernblot)、流式细胞仪 (FACS)检测p2 7表达。用激光共聚焦显微镜 (Confocal)检测p2 7蛋白的亚细胞分布。将p2 7 ASON经脂质体 (LipofectAMINE)包裹转染人卵巢癌细胞A2 780、CAOV3,用台盼蓝排除实验法和FACS检测细胞凋亡率来分别比较单层细胞、p2 7 ASON转染前后培养的MCS的紫杉醇敏感性。结果 (1)Westernblot、Confocal检测提示MCS中p2 7表达明显高于单层细胞 ,FACS检测也提示将单层细胞培养成MCS时 ,其p2 7表达明显增高 (PA2 780 =0 .0 11,PCAOV3 =0 .0 2 4 ) ,G0 G1期细胞比率增加 ,S期和G2 M期细胞比率降低。 (2 )不同浓度的紫杉醇 (0 .2、2 .0、10 .0、2 0 .0 μmol/L)作用后 ,MCS细胞抑制率明显低于单层细胞 (PA2 780 =0 .0 0 3,PCAOV3 =0 .0 15 ) ;经 2 0 .0 μmol/L的紫杉醇作用后 ,单层细胞的细胞凋亡率明显高于MCS ,差异有显著意义。 (3)p2 7 ASON转染前培养的MCS较致密 ,而转染后的较疏松。 (4 )p2 7 A
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