肌肉瘤小鼠模型建立及其血管内皮生长因子C、D的表达

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目的建立横纹肌肉瘤模型,研究肌肉瘤淋巴道转移机制,为临床肌肉瘤治疗提供理论依据。方法取清洁级昆明系小鼠30只,用S180小鼠癌性腹腔积液,体外培养S-180肉瘤细胞系,待细胞在培养瓶内长满单层后,收集细胞,制成5×107/ml的细胞悬液。利用稳定4~5代的瘤细胞,在小鼠臀部相同部位肌层种植,建立肌纤维肉瘤的原位瘤种植模型,观察肿瘤的生长情况。1周后处死小鼠,切取瘤体,检测肿瘤体积、重量及开胸、腹观察肿瘤转移情况及不同时期肿瘤血管、淋巴管生长与肿瘤生长转移的关系。取肿瘤组织包埋制备切片,应用免疫组化、Western blotting等方法检测血管内皮生长因子C、D(VEGF-C、VEGF-D)蛋白质表达。结果横纹肌肉瘤组织中心区和边缘区均存在淋巴管,数量随肿瘤的生长明显增加,这预示着横纹肌肉瘤组织中存在淋巴管的增生和新生,其可能与VEGF-C和VEGF-D的诱导密切相关。结论横纹肌肉瘤组织(淋巴管)中VEGF-C和VEGF-D的表达增高,VEGF-C和VEGF-D是重要的促淋巴管形成因子,从而促进横纹肌肉瘤的淋巴道转移。
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